การวินิจฉัยในห้องปฏิบัติการของโรคติดเชื้อเกือบทั้งหมดนั้นขึ้นอยู่กับการตรวจหาแอนติบอดีในเลือดของผู้ป่วยซึ่งผลิตขึ้นเพื่อต่อต้านแอนติเจนของเชื้อโรคโดยวิธีปฏิกิริยาทางซีรั่ม พวกเขาเข้ารับการรักษาตั้งแต่ปลายศตวรรษที่ 19 ถึงต้นศตวรรษที่ 20
การพัฒนาของวิทยาศาสตร์ได้ช่วยกำหนดโครงสร้างแอนติเจนของจุลินทรีย์และสูตรทางเคมีของสารพิษของพวกมัน สิ่งนี้ทำให้สามารถสร้างไม่เพียง แต่การรักษา แต่ยังรวมถึงซีรั่มการวินิจฉัยด้วย ได้มาจากการบริหารเชื้อก่อโรคที่ลดทอนให้สัตว์ทดลอง หลังจากสัมผัสเป็นเวลาหลายวัน เลือดของกระต่ายหรือหนูจะถูกใช้เพื่อเตรียมยาที่ใช้ในการระบุจุลินทรีย์หรือสารพิษของพวกมันโดยใช้การทดสอบทางซีรั่ม
อาการภายนอกของปฏิกิริยาดังกล่าวขึ้นอยู่กับสภาวะของการตั้งค่าและสถานะของแอนติเจนในเลือดของผู้ป่วย หากอนุภาคจุลินทรีย์ไม่ละลายน้ำ จะตกตะกอน สลาย จับหรือตรึงในซีรัม หากแอนติเจนละลายได้ ปรากฏการณ์การวางตัวเป็นกลางหรือการตกตะกอนก็จะปรากฏขึ้น
ปฏิกิริยาเกาะติดกัน (RA)
การทดสอบการเกาะติดกันทางซีรัมวิทยามีความเฉพาะเจาะจงสูง ทำได้ง่ายและค่อนข้างภาพเพื่อตรวจสอบการปรากฏตัวของแอนติเจนในเลือดของผู้ป่วยได้อย่างรวดเร็ว ใช้เพื่อทดสอบปฏิกิริยาวิดัล (การวินิจฉัยโรคไข้ไทฟอยด์และไข้รากสาดเทียม) และไวเกิล (ไข้ไทฟอยด์)
มันขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์เฉพาะระหว่างแอนติบอดีของมนุษย์ (หรือ agglutinins) กับเซลล์จุลินทรีย์ (agglutenogens) หลังจากปฏิสัมพันธ์กัน อนุภาคจะตกตะกอน นี่เป็นสัญญาณบวก สามารถใช้จุลินทรีย์ที่มีชีวิตหรือถูกฆ่า เชื้อรา โปรโตซัว เซลล์เม็ดเลือด และเซลล์โซมาติกเพื่อสร้างปฏิกิริยาได้
เคมี ปฏิกิริยาแบ่งออกเป็นสองขั้นตอน:
- การเชื่อมต่อเฉพาะของแอนติบอดี (AT) กับแอนติเจน (AG)
- ไม่เฉพาะเจาะจง - การตกตะกอนของกลุ่มบริษัท AG-AT นั่นคือการก่อตัวของเกาะติดกัน
ปฏิกิริยาการเกาะติดกันทางอ้อม (IPHA)
ปฏิกิริยานี้ไวกว่าปฏิกิริยาก่อนหน้า ใช้ในการวินิจฉัยโรคที่เกิดจากแบคทีเรีย ปรสิตภายในเซลล์ และโปรโตซัว มีความเฉพาะเจาะจงมากจนสามารถตรวจพบแอนติบอดีที่มีความเข้มข้นต่ำมากได้
เซลล์เม็ดเลือดแดงของแกะบริสุทธิ์และเซลล์เม็ดเลือดแดงของมนุษย์ที่ได้รับการบำบัดล่วงหน้าด้วยแอนติบอดีหรือแอนติเจนจะถูกนำมาใช้ในการผลิต (ขึ้นอยู่กับสิ่งที่ช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการต้องการหา) ในบางกรณี เซลล์เม็ดเลือดแดงของมนุษย์ได้รับการรักษาด้วยอิมมูโนโกลบูลิน ปฏิกิริยาทางซีรั่มวิทยาของเม็ดเลือดแดงถือว่าเกิดขึ้นหากตกลงไปที่ด้านล่างของหลอด เกี่ยวกับปฏิกิริยาเชิงบวกบอกว่าเมื่อเซลล์ถูกจัดเรียงเป็นร่มกลับด้าน ครอบครองด้านล่างทั้งหมด ปฏิกิริยาเชิงลบจะถูกนับหากเม็ดเลือดแดงตกลงในคอลัมน์หรือในรูปแบบของปุ่มที่อยู่ตรงกลางด้านล่าง
ปฏิกิริยาหยาดน้ำฟ้า (RP)
ปฏิกิริยาทางซีรั่มประเภทนี้ใช้เพื่อตรวจจับอนุภาคแอนติเจนที่มีขนาดเล็กมาก สิ่งเหล่านี้อาจเป็นตัวอย่างเช่น โปรตีน (หรือบางส่วนของพวกมัน) สารประกอบของโปรตีนที่มีไขมันหรือคาร์โบไฮเดรต ส่วนของแบคทีเรีย และสารพิษของพวกมัน
ซีรั่มสำหรับปฏิกิริยานั้นได้มาจากสัตว์ที่ปลอมแปลงซึ่งมักจะเป็นกระต่าย ด้วยวิธีนี้คุณจะได้เซรั่มที่ตกตะกอนอย่างแน่นอน การตั้งค่าของปฏิกิริยาการตกตะกอนในซีรั่มนั้นคล้ายคลึงกันในกลไกการออกฤทธิ์กับปฏิกิริยาการเกาะติดกัน แอนติบอดีที่มีอยู่ในซีรัมรวมกับแอนติเจนในสารละลายคอลลอยด์ ทำให้เกิดโมเลกุลโปรตีนขนาดใหญ่ที่ฝากไว้ที่ด้านล่างของหลอดหรือบนซับสเตรต (เจล) วิธีนี้ถือว่ามีความเฉพาะเจาะจงสูงและสามารถตรวจจับสารในปริมาณเล็กน้อยได้
ใช้วินิจฉัยกาฬโรค ทูลาเรเมีย แอนแทรกซ์ เยื่อหุ้มสมองอักเสบ และโรคอื่นๆ นอกจากนี้เขายังมีส่วนร่วมในการตรวจทางนิติเวช
ปฏิกิริยาการตกตะกอนของเจล
ปฏิกิริยาทางซีรั่มสามารถทำได้ไม่เฉพาะในตัวกลางที่เป็นของเหลวเท่านั้น แต่ยังรวมถึงเจลวุ้นด้วย นี้เรียกว่าวิธีการตกตะกอนแบบกระจาย ด้วยความช่วยเหลือของมันได้ทำการศึกษาองค์ประกอบของสารผสมแอนติเจนที่ซับซ้อน วิธีนี้อิงตามเคมีบำบัดของแอนติเจนต่อแอนติบอดีและในทางกลับกัน ในเจลที่พวกเขาเคลื่อนไหวเข้าหากันด้วยความเร็วที่ต่างกัน แล้วพบกัน ก่อตัวเป็นสายฝน แต่ละบรรทัดคือ AG-AT หนึ่งชุด
ปฏิกิริยาการทำให้เป็นกลาง Exotoxin กับแอนติทอกซิน (PH)
ต่อต้านพิษซีรั่มสามารถต่อต้านการกระทำของ exotoxin ที่ผลิตโดยจุลินทรีย์ ปฏิกิริยาทางซีรั่มเหล่านี้ขึ้นอยู่กับสิ่งนี้ จุลชีววิทยาใช้วิธีนี้ในการไตเตรทซีรั่ม สารพิษ และทอกซอยด์ และกำหนดกิจกรรมการรักษาของพวกมัน พลังของการทำให้เป็นกลางของสารพิษถูกกำหนดโดยหน่วยทั่วไป - AE
นอกจากนี้ ปฏิกิริยานี้จึงสามารถระบุชนิดหรือชนิดของสารพิษได้ ใช้ในการวินิจฉัยโรคบาดทะยัก คอตีบ โบทูลิซึม การศึกษาสามารถทำได้ทั้ง "บนกระจก" และในเจล
ปฏิกิริยาการสลาย (RL)
ภูมิคุ้มกันที่เข้าสู่ร่างกายของผู้ป่วย นอกจากหน้าที่หลักของภูมิคุ้มกันแบบพาสซีฟแล้ว ยังมีคุณสมบัติในการสลายด้วย สามารถละลายสารจุลินทรีย์ เซลล์แปลกปลอม และไวรัสที่เข้าสู่ร่างกายของผู้ป่วยได้ ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับความจำเพาะของแอนติบอดีที่รวมอยู่ในซีรัม แบคเทอริโอไลซิน ไซโตไลซิน สไปโรเชโทลิซิน ฮีโมลิซิน และอื่นๆ จะถูกแยกออก
แอนติบอดีจำเพาะเหล่านี้เรียกว่า "ส่วนประกอบ" พบในของเหลวในร่างกายมนุษย์เกือบทั้งหมด มีโครงสร้างโปรตีนที่ซับซ้อน และไวต่ออุณหภูมิที่เพิ่มขึ้น การสั่นไหว กรด และแสงแดดโดยตรง แต่ในสภาพแห้งก็สามารถคงไว้ได้สลายตัวได้นานถึงหกเดือน
มีปฏิกิริยาทางซีรั่มประเภทนี้:
- สลายแบคทีเรีย;
- ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก
การสลายแบคทีเรียจะดำเนินการโดยใช้ซีรั่มในเลือดของผู้ป่วยและเซรั่มภูมิคุ้มกันจำเพาะที่มีจุลินทรีย์ที่มีชีวิต หากมีส่วนประกอบในเลือดเพียงพอ ผู้วิจัยจะเห็นแบคทีเรียสลาย และปฏิกิริยาจะถือเป็นบวก
ปฏิกิริยาทางซีรั่มที่สองของเลือดคือการระงับเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้ป่วยด้วยซีรั่มที่ประกอบด้วย hemolysins ซึ่งจะถูกกระตุ้นเมื่อมีคำชมเชยเท่านั้น หากมีอย่างใดอย่างหนึ่ง ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจะสังเกตการละลายของเซลล์เม็ดเลือดแดง ปฏิกิริยานี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในการแพทย์แผนปัจจุบันเพื่อกำหนดระดับการเติมเต็ม (นั่นคือปริมาณที่น้อยที่สุดที่กระตุ้นการสลายของเม็ดเลือดแดง) ในซีรัมในเลือด และทำการวิเคราะห์สำหรับการตรึงส่วนเติมเต็ม ด้วยวิธีนี้จะทำการทดสอบซีรั่มสำหรับซิฟิลิส - ปฏิกิริยา Wasserman
ปฏิกิริยาการตรึงเสริม (CFR)
ปฏิกิริยานี้ใช้เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อสารติดเชื้อในซีรัมในเลือดของผู้ป่วย ตลอดจนระบุเชื้อโรคด้วยโครงสร้างแอนติเจน
จนถึงตอนนี้ เราได้อธิบายปฏิกิริยาทางซีรั่มอย่างง่ายแล้ว RSK ถือเป็นปฏิกิริยาที่ซับซ้อน เนื่องจากไม่ใช่สององค์ประกอบ แต่มีองค์ประกอบสามอย่างที่โต้ตอบกัน ได้แก่ แอนติบอดี แอนติเจน และส่วนประกอบ สาระสำคัญของมันอยู่ในความจริงที่ว่าปฏิสัมพันธ์ระหว่างแอนติบอดีและแอนติเจนเกิดขึ้นเฉพาะเมื่อมีโปรตีนเสริมซึ่งถูกดูดซับบนพื้นผิวของคอมเพล็กซ์ AG-AT ที่เกิดขึ้น
แอนติเจนเองหลังจากเติมสารเติมแต่งได้รับการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญซึ่งแสดงคุณภาพของปฏิกิริยา อาจเป็นการสลาย การแตกของเม็ดเลือดแดง การตรึง การฆ่าเชื้อแบคทีเรียหรือแบคทีเรีย
ปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นในสองขั้นตอน:
- การก่อตัวของแอนติเจน-แอนติบอดีที่ซับซ้อนที่ผู้ตรวจมองไม่เห็น
- เปลี่ยนแอนติเจนภายใต้การกระทำของส่วนประกอบ ระยะนี้มักจะติดตามได้ด้วยตาเปล่า หากไม่เห็นปฏิกิริยาด้วยสายตา ระบบจะใช้ระบบตัวบ่งชี้เพิ่มเติมเพื่อระบุการเปลี่ยนแปลง
ระบบอินดิเคเตอร์
ปฏิกิริยานี้มีพื้นฐานมาจากการตรึงคอมพลีเมนต์ เซลล์เม็ดเลือดแดง ram บริสุทธิ์และซีรั่ม hemolytic ที่ปราศจากคอมพลีเมนต์จะถูกเติมลงในหลอดทดลองหนึ่งชั่วโมงหลังจากที่ RSC ถูกตั้งค่า หากสารเติมเต็มที่ไม่ถูกผูกไว้ยังคงอยู่ในหลอดทดลอง ส่วนประกอบนั้นจะเข้าร่วมกับคอมเพล็กซ์ AG-AT ที่เกิดขึ้นระหว่างเซลล์เม็ดเลือดแกะและฮีโมไลซิน และทำให้พวกมันละลาย นี่จะหมายความว่า RSK เป็นค่าลบ หากเม็ดเลือดแดงยังคงไม่บุบสลาย ปฏิกิริยาจะเป็นบวก
ทดสอบฮีแมกกลูติเนชั่น (RGA)
มีสองปฏิกิริยา hemagglutination ที่แตกต่างกันโดยพื้นฐาน หนึ่งในนั้นคือซีรั่มใช้สำหรับกำหนดกลุ่มเลือด ในกรณีนี้ เซลล์เม็ดเลือดแดงจะมีปฏิกิริยากับแอนติบอดี
และที่สองปฏิกิริยานี้ใช้ไม่ได้กับเซรุ่มวิทยา เนื่องจากเซลล์เม็ดเลือดแดงทำปฏิกิริยากับฮีแมกกลูตินินที่ผลิตโดยไวรัส เนื่องจากเชื้อโรคแต่ละตัวจะทำหน้าที่เฉพาะกับเซลล์เม็ดเลือดแดง (ไก่ แกะ ลิง) ปฏิกิริยานี้จึงถือว่ามีความเฉพาะเจาะจงสูง
คุณสามารถบอกได้ว่าปฏิกิริยาเป็นบวกหรือลบโดยตำแหน่งของเซลล์เม็ดเลือดที่ด้านล่างของหลอดทดลอง หากรูปแบบของมันคล้ายกับร่มกลับหัว แสดงว่าไวรัสที่ต้องการนั้นมีอยู่ในเลือดของผู้ป่วย และถ้าเม็ดเลือดแดงทั้งหมดก่อตัวเป็นคอลัมน์เหรียญ ก็ไม่มีเชื้อโรคที่ต้องการ
การทดสอบการยับยั้งฮีแมกกลูติเนชั่น (HITA)
นี่เป็นปฏิกิริยาที่จำเพาะเจาะจงมากซึ่งช่วยให้คุณระบุชนิด ประเภทของไวรัส หรือการมีอยู่ของแอนติบอดีจำเพาะในเลือดของผู้ป่วย
สาระสำคัญอยู่ที่ความจริงที่ว่าแอนติบอดีที่เติมลงในหลอดทดลองด้วยวัสดุทดสอบช่วยป้องกันการสะสมของแอนติเจนบนเม็ดเลือดแดงจึงหยุด hemagglutination นี่เป็นสัญญาณเชิงคุณภาพของการมีอยู่ในเลือดของแอนติเจนจำเพาะสำหรับไวรัสที่เจาะจง
ปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน (RIF)
ปฏิกิริยานี้ขึ้นอยู่กับความสามารถในการตรวจหาสารเชิงซ้อน AG-AT ด้วยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงหลังการรักษาด้วยสีย้อมฟลูออโรโครม วิธีนี้ง่ายต่อการจัดการ ไม่ต้องการการแยกจากวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ และใช้เวลาเพียงเล็กน้อย จำเป็นสำหรับการวินิจฉัยโรคติดเชื้ออย่างรวดเร็ว
ในทางปฏิบัติ ปฏิกิริยาทางซีรั่มเหล่านี้แบ่งออกเป็นสองประเภท: ทางตรงและทางอ้อม
Direct RIF ผลิตจากแอนติเจนซึ่งได้รับการบำบัดล่วงหน้าด้วยเซรั่มเรืองแสง และทางอ้อมก็คือ ขั้นแรก ยาจะได้รับการรักษาด้วยการวินิจฉัยแบบธรรมดาที่มีแอนติเจนสำหรับแอนติบอดีที่น่าสนใจ จากนั้นจึงนำเซรั่มเรืองแสงซึ่งจำเพาะสำหรับโปรตีนของ AG-AT complex กลับมาใช้อีกครั้ง และเซลล์จุลินทรีย์ มองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์
