ตามสถิติของ WHO ในช่วง 40 ปีที่ผ่านมา มีผู้เสียชีวิตจากโรคเอดส์ 25 ล้านคน ความเสียหายจากการติดเชื้อนี้มีมหาศาล ผู้ติดเชื้อส่วนใหญ่อยู่ในแอฟริกา ซึ่งการติดเชื้อนี้มาจากไหน ด้วยเอชไอวีการวินิจฉัยโรคมีความเกี่ยวข้องเป็นพิเศษ จริงอยู่ ยังไม่มีวิธีรักษา HIV แต่การรักษาตั้งแต่เนิ่นๆ สามารถยืดอายุของผู้ป่วยและปรับปรุงคุณภาพได้
การวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี
การติดเชื้อ HIV ในระยะต่างๆ โดยวิธีการดังต่อไปนี้:
- ELISA - เอ็นไซม์อิมมูโนแอสเซย์
- Western blot.
- PCR - ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
- การทดสอบอย่างรวดเร็ว
วิธี PCR ได้รับการพัฒนาโดยนักชีวเคมีชาวอเมริกัน Kary Mullis ผู้ได้รับรางวัลโนเบลในปี 1983 วันนี้วิธีการทางการแพทย์ในการวินิจฉัยการติดเชื้อทั้งหมดถือเป็นวิธีชั้นนำเนื่องจากเนื้อหาข้อมูลและความถูกต้องแม่นยำ เอชไอวีก็ไม่มีข้อยกเว้นในเรื่องนี้
สาระสำคัญของการวิเคราะห์
เซลล์ที่มีชีวิตใดๆ มี RNA และ DNA กรดนิวคลีอิกเหล่านี้สามารถคัดลอกตัวเองและทำซ้ำได้ สำหรับการติดเชื้อแต่ละครั้ง ชิ้นส่วนดีเอ็นเอจะมีลักษณะเฉพาะ ที่ในของเหลวชีวภาพ เศษกรดนิวคลีอิกเหล่านี้ไหลเวียนอยู่ พวกมันถูกจับและรับรู้โดยอุปกรณ์พิเศษ - เครื่องปฏิกรณ์ นี่คือพื้นฐานของวิธีการ ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการนับชิ้นส่วนเหล่านี้ retrovirus HIV ได้รับการตรวจสอบสำหรับ RNA แม้จะคัดลอกอนุภาคไวรัสเพียงชุดเดียว PCR ก็สามารถตรวจจับและนับได้
เลือดดำมักใช้เป็นของเหลวในการทดสอบ ส่วนประกอบพิเศษของวิธีการผูกกับอนุภาคไวรัสและทำให้สามารถตรวจจับได้ เนื่องจากชิ้นส่วนที่พบจะถูกคูณ
ในกรณีของเอชไอวีผลของการปรากฏตัวของไวรัสจะได้รับนานก่อนที่คลินิกจะปรากฏขึ้น ดังนั้นเนื่องจากความไวแสงสูง PCR จึงมีค่าการวินิจฉัยที่สูงเช่นนี้ ข้อดีอย่างมากของ PCR คือความเก่งกาจของวิธีการ ระยะฟักตัวของการติดเชื้อ PCR ไม่เป็นอุปสรรค
ค่าวิจัย
วิธี PCR ค่อนข้างแพง นี่เป็นหนึ่งในข้อเสียใหญ่ของมัน ต้องใช้อุปกรณ์ใหม่ล่าสุดและผู้ช่วยห้องปฏิบัติการที่มีคุณสมบัติสูง จากที่กล่าวมาข้างต้น การวินิจฉัย PCR จะไม่ดำเนินการในการตั้งถิ่นฐานขนาดเล็ก ตรวจได้ในคลินิกเฉพาะทางขนาดใหญ่เท่านั้น
ค่าใช้จ่ายในการตรวจ DNA ในคลินิกมอสโกเริ่มต้นที่ 2,800 rubles ปริมาณไวรัส (RNA ของไวรัสในพลาสมา) ถูกกำหนดโดย PCR - จาก 8,800 rubles และความต้านทาน HIV ต่อสารยับยั้งโปรตีเอส - จาก 16,500 rubles อย่างที่คุณเห็นราคาค่อนข้างสูง PCR สามารถทำได้ฟรีในคลินิกของรัฐภายใต้นโยบาย MHI สิ่งสำคัญ,ว่าขั้นตอนสามารถทำได้โดยไม่ระบุชื่อ ในทะเบียนผู้ป่วยจะได้รับหมายเลขซึ่งเขาสามารถค้นหาผลลัพธ์ได้ ในศูนย์การแพทย์สมัยใหม่ มีบัญชีส่วนบุคคลของลูกค้าที่จะป้อนข้อมูลเหล่านี้
วัตถุประสงค์การวิจัย
PCR การวินิจฉัยสำหรับ HIV ในกรณีดังกล่าว:
- การตรวจจับการติดเชื้อในเด็กที่เกิดจากแม่ที่ป่วยหรือพาหะเพื่อตรวจหาการติดเชื้อในมดลูก
- หาก ELISA ให้ผลลัพธ์ที่น่าสงสัย (PCR สำหรับ HIV ช่วยในกรณีนี้ในการวินิจฉัยขั้นสุดท้าย)
- ตรวจจับเนื้อหาเชิงปริมาณของไวรัสในร่างกาย
- ด้วยอิมมูโนบล็อกเชิงบวก พวกมันจะเสริมซึ่งกันและกันด้วย PCR
- ทดสอบผู้บริจาค
- สำหรับการวินิจฉัย HIV ในระยะเริ่มต้น
- เพื่อกำหนดประสิทธิภาพและการต่อต้าน ART.
ข้อดีของการวิเคราะห์นี้คือ PCR สำหรับ HIV สามารถทำได้แม้ในเด็กอายุต่ำกว่า 1 ขวบ
การวิจัยมักไม่ได้ทำเพื่อการวินิจฉัยเบื้องต้น แต่อยู่ในขั้นตอนการรักษาแล้ว การวินิจฉัยเบื้องต้นเป็นการศึกษาทางซีรั่มวิทยา (กำหนดระดับของแอนติบอดีต่อเอชไอวี) หากผลบวกลวงซ้ำ อาจเป็นเพราะไวรัสโหลดต่ำ
PCR วินิจฉัย HIV เมื่อยังไม่มีแอนติบอดี้ วิธี ELISA ในกรณีนี้จะไม่ให้คำตอบ
และ PCR สำหรับ HIV จะเป็นบวกแล้ว แต่อาการของเอชไอวีในระยะนี้ไม่เฉพาะเจาะจง ผู้ป่วยจะได้รับการรักษาครั้งแรกเป็นเวลานานและไม่ประสบผลสำเร็จสำหรับ ARVI โดยแพทย์ทั่วไป พึงระลึกไว้เสมอว่าการวินิจฉัยเอชไอวีนั้นขึ้นอยู่กับไม่ได้ใส่ PCR จำเป็นต้องผ่านการทดสอบที่ครอบคลุมอื่น ๆ วิธี PCR มักจะช่วยในกรณียากๆ
เตรียมวิเคราะห์
ก่อนทำ PCR สำหรับ HIV 2 วันก่อนการทดสอบ คุณไม่ควรกินอาหารที่มีไขมัน แอลกอฮอล์ นอกจากนี้ยังเป็นการดีกว่าที่จะไม่เครียดทางจิตใจและร่างกาย หากผู้ป่วยได้รับการกำหนดหลักสูตรการกระตุ้นภูมิคุ้มกัน จะหยุดก่อนการวิเคราะห์ 2 สัปดาห์
ควรถ่ายเลือดในตอนเช้า นอกจากนี้ยังสามารถตรวจสอบของเหลวทางชีวภาพอื่น ๆ ของร่างกาย (สเปิร์ม, การหลั่งในช่องคลอด) ได้ แต่เลือดเป็นวัสดุที่ดีที่สุด น้ำลาย เหงื่อ ปัสสาวะ และน้ำตา ไม่ได้ใช้ เนื่องจากมีไวรัสในนั้นน้อย
ข้อดีของ PCR สำหรับ HIV
ข้อดีของวิธีนี้คือความน่าจะเป็นที่ต่ำมากที่จะได้ผลบวกลวง ความเป็นสากลของปฏิกิริยาสำหรับของเหลวทางชีวภาพของร่างกาย การวิเคราะห์มีหลากหลาย:
- เจาะเลือดเพียงครั้งเดียวเพื่อตรวจหาการติดเชื้อต่างๆ
- เทคนิคเร่งด่วน ผลลัพธ์พร้อมวันรุ่งขึ้น
- ความมั่นใจอยู่ระหว่าง 85 ถึง 98%
- ตรวจหาเชื้อ HIV ได้ 10-14 วันหลังจากติดเชื้อ (ตอนนี้ยังไม่มีแอนติบอดี)
- ไม่จำกัดอายุ ทำได้ทันทีตั้งแต่แรกเกิด
ข้อเสียของวิธีการ
ข้อเสียของ PCR มีดังนี้:
- ต้นทุนการวิเคราะห์
- ต้องใช้อุปกรณ์ทางการแพทย์ที่ทันสมัย
- ต้องการผู้ช่วยห้องปฏิบัติการและแพทย์ที่มีคุณสมบัติสูงการวิเคราะห์ผู้รับ
- ปฏิกิริยามีความไวสูง ดังนั้นข้อผิดพลาดอาจเป็น 20%
- อาจส่งผลเท็จหากผู้ป่วยมีกระบวนการภูมิต้านตนเอง เนื้องอก การติดเชื้อเรื้อรัง
- ความสะอาดเป็นพิเศษของห้องทดลองเป็นสิ่งจำเป็นเพราะไวรัสสามารถเข้าสู่การวิเคราะห์จากอากาศได้ แล้วผลจะผิดพลาด
สำหรับห้องปฏิบัติการที่ดำเนินการ PCR เพื่อปรับปรุงคุณภาพของการวินิจฉัย มาตรการพิเศษที่เข้มงวดได้รับการพัฒนาตามระบบ SanPiN สำหรับการควบคุมภายใน นอกจากนี้ ต้องปฏิบัติตามกฎทั้งหมดของการทำงานกับเทคนิคนี้:
- ต้องปฏิบัติตามอย่างเคร่งครัดกับข้อมูลในหลอดทดลอง
- ก่อนเก็บตัวอย่างเลือด ดูอีกครั้งและตรวจดูให้แน่ใจว่าได้กำหนดเวลาการวิเคราะห์แล้ว
- พยาบาลต้องติดฉลากหลอดให้ถูกต้อง
- ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการต้องดำเนินการจัดการทั้งหมดอย่างถูกต้องด้วยวัสดุชีวภาพเพื่อป้องกันการปนเปื้อนข้าม
- ระบบทดสอบต้องมีคุณภาพดีเยี่ยม
หากตรงตามเงื่อนไขเหล่านี้ทั้งหมด ข้อผิดพลาดในคำตอบสามารถมีได้เพียง 2% ของตอนเท่านั้น
ระยะเวลาวิเคราะห์
หลายคนสนใจว่า PCR สำหรับ HIV จะพร้อมนานแค่ไหน การวินิจฉัยใช้เวลาไม่เกิน 8 ชั่วโมง ผู้ป่วยอาจได้รับคำตอบในวันถัดไป การทดสอบด่วนจะดำเนินการภายใน 2 ชั่วโมง
ความน่าเชื่อถือของ PCR
แม้ว่าจะมีข้อดีหลายประการ แต่ PCR ก็ไม่ถือว่าเป็นวิธีการวินิจฉัยในอุดมคติ เขาได้รับการติดต่อในกรณีจำเป็นต้องได้รับการตรวจคัดกรองเอชไอวีในร่างกาย
เจาะเลือดเมื่อไหร่
PCR สำหรับ HIV นานแค่ไหน? สามารถรับผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้เมื่อถ่ายเลือด 4-4 วันหลังจากการติดเชื้อที่ถูกกล่าวหา หลังจาก 2 สัปดาห์ ความน่าเชื่อถือของ HIV จะอยู่ที่ 98% และระยะเวลา 5 วัน - 80% การปรากฏตัวของผลลัพธ์เชิงลบใน PCR สำหรับ HIV จะเชื่อถือได้ แต่สำหรับผลลัพธ์ที่แม่นยำอย่างยิ่ง ELISA ก็ถูกดำเนินการเช่นกัน
การวิเคราะห์ ELISA จะมีผลก็ต่อเมื่อมีแอนติบอดีต่อไวรัส คราวนี้อาจใช้เวลาตั้งแต่ 1-3 เดือนถึงหกเดือน เนื่องจาก ELISA ให้ความน่าจะเป็นสูงกว่า (98% -99.9%) จึงไม่สามารถเรียกได้ว่า PCR เป็นการทดสอบยืนยัน 100% สำหรับการติดเชื้อเอชไอวี แต่ในทางกลับกัน นี่เป็นเทคนิคเดียวที่คุณไม่จำเป็นต้องรอให้แอนติบอดีออกมา
ด้วยเอชไอวี PCR สามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับประสิทธิผลของยาต้านไวรัส ระยะของโรคเอชไอวี และจำนวนของ VNs (การประเมินเชิงปริมาณของการมีอยู่ของเอชไอวีในร่างกาย) นี้จะพูดถึงความรุนแรงและขอบเขตของการเปลี่ยนแปลง
การตรวจ PCR สำหรับเอชไอวีก็เป็นสิ่งจำเป็นเช่นกันหากมีแอนติบอดีในเลือด แต่การมีอยู่ของพวกมันไม่ได้บ่งบอกถึงความน่าเชื่อถือของการติดเชื้อเอชไอวีในทางคลินิก
พวกเขาได้รับการทดสอบไม่เพียง แต่สำหรับการติดเชื้อและการมีเพศสัมพันธ์แบบไม่เป็นทางการ โอกาสอื่นๆ:
- วางแผนการตั้งครรภ์
- กำลังดำเนินการ
- เซ็กส์ทั่วไป
- บางวิชาชีพกำหนดให้ต้องสอบเพื่อเข้าทำงาน (ครู แพทย์ และบุคลากรทางการแพทย์อื่นๆ)
- นักโทษ
- ผู้ป่วยวัณโรค
- พนักงานกระทรวงสถานการณ์ฉุกเฉินและตำรวจ
- กลับจากพักร้อนจากประเทศต่าง ๆ (ถ้าคุณต้องการให้แน่ใจว่าไม่มีการติดเชื้อ)
- โสเภณี
- นักศึกษาต่างชาติ
- ยาเสพติด
อาการบางอย่างในผู้ป่วยอาจบังคับให้ตรวจ HIV:
- ลดน้ำหนักกะทันหัน
- ท้องเสียนานกว่า 3 สัปดาห์
- อุณหภูมิสูงเกินสมควรมาเป็นเวลานาน
- ต่อมน้ำเหลืองบวม
- สาเหตุของโรคปอดบวม เชื้อราในเชื้อรา เป็นต้น
การถอดรหัสการวิเคราะห์เป็นอภิสิทธิ์ของแพทย์ที่เข้าร่วม ไม่ใช่ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการ
PCR หรือ ELISA อันไหนดีกว่ากัน
เมื่อตรวจพบ PCR-diagnosis ของไวรัส HIV RNA ทั้งในเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณ การวิเคราะห์นี้ระบุเชื้อโรคที่เฉพาะเจาะจงได้อย่างชัดเจน แม้ว่าจะมีเชื้อโรคที่ทำปฏิกิริยาข้ามได้หลายตัวก็ตาม วัสดุชีวภาพสามารถใช้ได้แม้ในรูปแบบแห้ง ข้อเสียคือความไวสูงของ PCR เมื่อสามารถให้ผลบวกที่ผิดพลาดได้จากการมี DNA แปลกปลอมจำนวนเล็กน้อยบนเครื่องมือหรือหลอดทดลอง
งานและความเป็นไปได้ของ ELISA คือการตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติบอดีต่อไวรัสย้อนยุค แม้ว่าความแม่นยำจะอยู่ที่ 99% แต่ก็ใช้ไม่ได้ในระยะแรก
การตรวจ HIV เชิงคุณภาพ
PCR คุณภาพสูงสำหรับ HIV กำหนดการปรากฏตัวของไวรัสในร่างกาย ผลลัพธ์ในกรณีนี้จะมีลักษณะดังนี้: positive, false positive, negative แต่การศึกษานี้จะไม่ให้ข้อมูลเกี่ยวกับปริมาณไวรัสย้อนหลัง การวิเคราะห์เชิงคุณภาพดังกล่าวไม่เหมาะสมเมื่อตรวจพบการติดเชื้อเอชไอวีในร่างกายด้วยวิธีอื่น
เป็นไปไม่ได้ที่จะควบคุมประสิทธิภาพของการรักษาด้วย PCR คุณภาพสูง
ปริมาณเอชไอวี
ดำเนินการโดยผู้ติดเชื้อ HIV เท่านั้นเพื่อนับจำนวนสำเนาของไวรัส RNA ในผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพ
การศึกษาดังกล่าวมีวัตถุประสงค์เพื่อติดตามการรักษาอย่างต่อเนื่องและระบุการดื้อต่อไวรัส การรักษาด้วยยาต้านไวรัสในการคำนวณดังกล่าวไม่ได้กำหนดโดยแพทย์แบบสุ่มสี่สุ่มห้าดังนั้นจึงจะมีประสิทธิภาพมากขึ้น PCR เชิงปริมาณสำหรับการติดเชื้อ HIV ทำได้บ่อยกว่ามาก การวิเคราะห์นี้แสดงเป็นสำเนา/มิลลิลิตรของเลือด
ผลลัพธ์ที่ได้:
- ไวรัสอาร์เอ็นเอหายไปหรือมีขนาดเล็กมาก (ประมาณ 20 ชุด/มล.) วินิจฉัยไม่แน่นอน
- จาก 20 - ถึง 10 ถึงสำเนาระดับที่ 6 / ml - การวินิจฉัยนั้นเชื่อถือได้
- มากกว่า 106 สำเนา/มล. - VN.สูง
ห้องปฏิบัติการสามารถทำการทดสอบ PCR แบบเรียลไทม์สำหรับ HIV นี่แสดงถึงการสังเกตและการประเมินเชิงตัวเลขของการสะสมผลิตภัณฑ์ PCR ด้วยการบันทึกผลลัพธ์โดยอัตโนมัติ
