การวิเคราะห์ PCR สำหรับ HPV: มันคืออะไร เตรียมตัวอย่างไรให้ผ่าน

2024 ผู้เขียน: Curtis Blomfield | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-16 21:38

ในบทความ ลองพิจารณาว่ามันคืออะไร - การวินิจฉัย PCR? ปัจจุบัน Human papillomavirus (HPV) เป็นโรคที่พบบ่อยมากซึ่งเกิดขึ้นในรูปแบบเรื้อรังและเต็มไปด้วยอาการกำเริบบ่อยครั้ง ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) เป็นวิธีการที่ทันสมัยที่สุดในการวินิจฉัยไวรัสแพพพิลโลมา วิธีนี้ถือว่าเชื่อถือได้มากและช่วยในการระบุไวรัสนี้ไม่เพียงแต่ในร่างกายมนุษย์เท่านั้น แต่ยังรวมถึงปริมาณและความหลากหลายของไวรัสด้วย การวิเคราะห์ PCR สำหรับ HPV นั้นมีความอ่อนไหวแม้ในรูปแบบที่ไม่ได้ใช้งานของไวรัส ซึ่งไม่มีอาการแสดงภายนอกในรูปแบบของหูดที่อวัยวะเพศและติ่งเนื้องอก

วิธีการขึ้นอยู่กับอะไร

จากการศึกษา DNA ของผู้ป่วยเพื่อตรวจหาสิ่งแปลกปลอมในสายโซ่นี้ ประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์สี่ตัวซึ่งจัดเรียงตามลำดับเฉพาะ หากไวรัสเข้าสู่ร่างกาย จะมีการเปลี่ยนแปลงลำดับในสายโซ่นี้ ซึ่งช่วยให้คุณสามารถตรวจสอบกิจกรรมของอนุภาคแปลกปลอมที่ไม่มีนัยสำคัญได้อย่างรอบคอบเทคนิคการวิจัย HPV PCR ดำเนินการโดยใช้อนุภาคไวรัส ซึ่งกำหนดอัตราการแบ่งเซลล์

งานวิจัยกำหนดอะไร

หลักการวินิจฉัยนี้ช่วยให้คุณติดตามกิจกรรมของ HPV ได้ไม่เพียงแต่ในขณะที่อยู่ในสถานะพาสซีฟ แต่ยังรวมถึงในช่วงระยะฟักตัวด้วย การวินิจฉัย PCR กำหนด:

• มี HPV ในร่างกาย;
• สายพันธุ์ที่ติดเชื้อของผู้ป่วย;
• เนื้อหาเชิงปริมาณในร่างกาย

Papillomavirus คนส่วนใหญ่ติดเชื้อ แต่ภูมิคุ้มกันที่แข็งแกร่งจะยับยั้งการแสดงออกของมันและไม่อนุญาตให้เพิ่มจำนวนขึ้น ดังนั้นการตรวจหา HPV ในเชิงคุณภาพจึงไม่สามารถพิสูจน์ได้เสมอไป เนื่องจากไม่สมเหตุสมผลหากมีอนุภาคไวรัสอยู่ในร่างกาย แต่ผลกระทบนั้นน้อยมากจนไม่เป็นอันตรายต่อบุคคล แต่อย่างใด การวิเคราะห์เชิงคุณภาพแสดงผลในเชิงบวก และสิ่งนี้มักจะทำให้คนสับสน

วิธีเชิงปริมาณ

ดังนั้น วิธีการเชิงปริมาณจึงมักใช้ในการวินิจฉัยโรค ซึ่งช่วยให้คุณติดตามจำนวนไวรัสในร่างกายและกำหนดได้ว่ากิจกรรมของพวกมันมีอันตรายแค่ไหน นอกจากนี้ สิ่งสำคัญคือต้องกำหนดสายพันธุ์ HPV ที่หลากหลาย พวกมันถูกแบ่งตามระดับของการเกิดมะเร็ง: บางชนิดสามารถกลายเป็นปัจจัยหลักในการเกิดโรคมะเร็ง ในขณะที่บางชนิดนั้นปลอดภัยอย่างยิ่งและอาจทำให้เกิดปัญหาด้านความงามบางอย่างเท่านั้น

แต่ละสถานการณ์ต้องใช้วิธีการของแต่ละคนดังนั้นก่อนที่จะทำการทดสอบในห้องปฏิบัติการนี้ ขอแนะนำให้ปรึกษาผู้เชี่ยวชาญที่มีคุณสมบัติซึ่งจะบอกคุณว่าควรทดสอบสายพันธุ์ใดและอย่างไร โดยคำนึงถึงสภาพของผู้ป่วยและอาการทางคลินิก

สิ่งบ่งชี้ในการนำ

เหตุผลที่สำคัญที่สุดในการทดสอบ PCR สำหรับ HPV คือการมีหูดที่ร่างกาย

ติดไวรัสนี้ได้จากคนเท่านั้น หลังจากเจาะเข้าไปในกระแสเลือดจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคเริ่มทวีคูณในชั้นบนของผิวหนังซึ่งนำไปสู่การพัฒนาของลักษณะที่ปรากฏ - การก่อตัวของ condylomas หรือ papillomas เนื่องจากโรคนี้พบได้บ่อยและเกิดขึ้นในเกือบ 80% ของประชากร โอกาสที่จะติดเชื้อจึงสูงมาก Papillomaviruses ถูกส่งผ่าน:

• มีเพศสัมพันธ์ที่ไม่มีการป้องกัน;
• ขณะจูบ;
• เมื่อคลอดลูกจากแม่;
• แบบบ้านๆ;
• สัมผัสกับผิวหนังอย่างใกล้ชิด

สิ่งบ่งชี้หลักสำหรับการตรวจเลือดและการตรวจ PCR สำหรับ HPV คืออาการทางผิวหนังของโรคนี้ ซึ่งดูเหมือนหูดที่ห้อยอยู่บนก้านเส้นบางคล้ายเส้นด้าย แม้ว่าจะไม่พบคอนดิโลมาดังกล่าวบนผิวหนัง แต่ไวรัสอาจยังคงอยู่ในเลือด แต่แน่นอนว่าจะไม่มีอาการ หากผู้ป่วยได้รับการวินิจฉัยว่าติดเชื้อ papillomavirus ของชนิดย่อยที่ 18 และ 16 ขอแนะนำให้ตรวจสอบโดยผู้เชี่ยวชาญเช่นนรีแพทย์และระบบทางเดินปัสสาวะเป็นประจำเพื่อรับการตรวจวินิจฉัยและทดสอบ HPV เพราะการวินิจฉัยอย่างทันท่วงทีเท่านั้นจึงจะสามารถป้องกันการพัฒนาของมะเร็งบางชนิดได้

ประเภทของเทคนิค

ในการวินิจฉัย PCR สำหรับ HPV มีการพัฒนาวิธีการทดสอบหลักสี่วิธี ซึ่งแต่ละวิธีมีคุณสมบัติเฉพาะบางประการและกำหนดโดยคำนึงถึงสภาพของผู้ป่วย จำเป็นต้องมีคำแนะนำจากผู้เชี่ยวชาญเพื่อเลือกวิธีที่ดีที่สุด ดังนั้น สี่วิธี:

1. วิธีการเชิงคุณภาพที่ใช้เพื่อหักล้างหรือยืนยันการมีไวรัสในร่างกาย ข้อเสียเปรียบหลักคือไม่สามารถสร้างชนิดของสายพันธุ์ HPV (เฉพาะ 14-21 ชนิด) ส่วนใหญ่มักใช้วิธีเชิงคุณภาพควบคู่ไปกับวิธีการอื่นในการตรวจหา papillomavirus รายงานผลลัพธ์โดยใช้การให้คะแนนสองระดับ: "ไม่พบ" หรือ "ตรวจพบ" กล่าวคือ เทคนิคนี้จะระบุการมีอยู่ของ DNA ต่างประเทศหรือระบุว่าไม่มี DNA
2. จีโนไทป์เป็นวิธีที่สามารถระบุไวรัสในร่างกายมนุษย์และสร้างความหลากหลายได้ วิธีนี้ใช้ในกรณีที่จำเป็นต้องตรวจสอบว่า DNA ของไวรัสยังคงอยู่หลังการรักษาหรือตรวจพบการกำเริบของโรคจากการติดเชื้อครั้งใหม่หรือไม่ จีโนไทป์ช่วยประเมินประสิทธิภาพของการรักษาโดยการกำหนดชนิดของ HPV หากเป็นสายพันธุ์เดียวกับที่ผู้ป่วยได้รับการรักษา แสดงว่าการรักษาไม่ประสบผลสำเร็จ หากการวิเคราะห์แสดงว่ามี HPV ชนิดอื่นอยู่ก็สามารถบ่งชี้ได้การติดเชื้อซ้ำ.
3. วิธีผสม ซึ่งเป็นวิธีการวินิจฉัยเฉพาะทางขั้นสูงโดยอาศัยการผสมผสานระหว่างการตรวจจับเชิงคุณภาพและ 16 สายพันธุ์โดยใช้การสร้างพันธุกรรม ผลลัพธ์สามารถแสดงได้ 3 คำตอบ: "ตรวจพบสายพันธุ์ 16", "ไม่พบ" และ "ตรวจพบเชื้อ HPV ประเภท 16" วิธีนี้ใช้เมื่อคุณสงสัยว่ามีไวรัสแพพพิลโลมาชนิดหนึ่งที่สามารถก่อให้เกิดมะเร็งปากมดลูกในสตรีได้
4. วิธี PCR เชิงปริมาณสำหรับ HPV ที่มีความเสี่ยงสูงในการก่อมะเร็ง ซึ่งช่วยให้คุณกำหนดระดับของไวรัสในเลือดและติดตามการพัฒนาได้ ถือว่าเป็นข้อมูลมากที่สุดเนื่องจากช่วยให้คุณสามารถกำหนดความรุนแรงของกระบวนการทางพยาธิวิทยาโดยพิจารณาจากการเลือกการรักษาที่ถูกต้อง เทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับการกำหนดจำนวนเซลล์ไวรัสภายใน 100,000 เซลล์ที่ทำการศึกษา หากผลรวมของพวกมันมากกว่า 5 แสดงว่ามี papillomavirus ที่มีความเข้มข้นสูงในร่างกาย ซึ่งจะเพิ่มโอกาสของเซลล์มะเร็ง หากจำนวนน้อยกว่า 3 ความเข้มข้นจะถือว่าเล็กน้อย

เตรียมตัวและสอบอย่างไร

เลือดสามารถใช้เป็นวัสดุชีวภาพสำหรับ HPV ได้ แต่สารคัดหลั่งจากท่อปัสสาวะในผู้ชายและปากมดลูกในผู้หญิงมักถูกถ่ายออกมา

ไม่จำเป็นต้องเตรียม PCR สำหรับ HPV เป็นพิเศษ เงื่อนไขหลักคือห้ามปัสสาวะก่อนทำหัตถการสักสองสามชั่วโมง นอกจากนี้ไม่แนะนำให้มีเพศสัมพันธ์ก่อนเรียนสัก 2-3 วันและไม่ควรดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ ในขณะเดียวกัน อย่าลืมขั้นตอนสุขอนามัยที่ใกล้ชิด

สำหรับผู้ชาย

ผู้ชายเอาไม้กวาด - ล้างหัวองคชาตและท่อปัสสาวะด้วยน้ำเกลือ ผู้เชี่ยวชาญใช้แปรงพิเศษซึ่งสอดเข้าไปในท่อปัสสาวะประมาณ 4 ซม. วัสดุชีวภาพจะถูกรวบรวมโดยหมุนเล็กน้อยวางในหลอดทดลองและส่งไปยังห้องปฏิบัติการเพื่อทำการวิจัย ในเวลาเดียวกัน คุณสามารถจัดเก็บได้ไม่เกิน 2 วันนับจากเวลาที่รวบรวม

ผู้หญิง

การละเลงเพื่อวิเคราะห์ PCR สำหรับ HPV ในสตรีดำเนินการดังนี้: ใช้น้ำยาฆ่าเชื้อที่ปากมดลูก จากนั้นใช้แปรงปัดกวาดออกจากช่องปากมดลูก อุปกรณ์ถูกสอดเข้าไปที่ความลึกประมาณ 1 ซม. หลังจากนั้นแพทย์จะขูดผนังคลองด้วยการเคลื่อนไหวแบบหมุน วัสดุชีวภาพถูกวางไว้ในหลอดทดลองพิเศษ โดยจะคงอยู่ประมาณ 15 วินาที ในนั้นผู้เชี่ยวชาญเช็ดกับผนังแล้วนำออก ถัดไป เนื้อหาของหลอดทดลองจะถูกส่งไปทดสอบในห้องปฏิบัติการ

การสุ่มตัวอย่างวัสดุที่เหมาะสมสำหรับการวิจัยคือกุญแจสู่การวินิจฉัยที่ประสบความสำเร็จและได้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือ หากในเวลาเดียวกันมีการละเมิดความเป็นหมันและจุลินทรีย์ต่างประเทศแทรกซึมเข้าไปในหลอดทดลองในระหว่างการวิเคราะห์อาจตรวจพบไวรัสซึ่งอันที่จริงไม่อยู่ในร่างกายของผู้ป่วย ข้อผิดพลาดอาจเกิดขึ้นได้เนื่องจากวัสดุที่ใช้สำหรับการวิจัยเพียงเล็กน้อย

พา PCR ไป HPV ที่ไหน หลายคนสนใจ การทดสอบสามารถทำได้ในทางการแพทย์ใด ๆคลินิกหรือห้องปฏิบัติการ เช่น ใน "Invitro" หรือ "Hemotest"

ประโยชน์ของวิธีการ

PCR เป็นหนึ่งในวิธีการวินิจฉัยหลักและในขณะนี้ยังคงเป็นที่นิยมมากที่สุดในหมู่แพทย์ การศึกษานี้ไม่เพียงแต่ดำเนินการเพื่อตรวจหาเชื้อ HPV เท่านั้น แต่ยังช่วยให้คุณตรวจหาจุลินทรีย์ทางพยาธิวิทยาอื่นๆ ที่สามารถติดต่อผ่านทางเพศได้ การวิเคราะห์ดังกล่าวช่วยวินิจฉัยการติดเชื้อที่ซ่อนอยู่ ไวรัสตับอักเสบ ฯลฯ การทดสอบ PCR สำหรับ HPV มีข้อดีเหนือวิธีการอื่นๆ ในการตรวจหาโรค สิทธิประโยชน์เหล่านี้คือ:

1. ความจำเพาะสูง. การวิเคราะห์ช่วยแยกร่องรอยของ DNA ต่างประเทศที่มีความน่าจะเป็นสูงเมื่อศึกษาวัสดุชีวภาพที่เก็บรวบรวม
2. ประสิทธิภาพสูง การศึกษา PCR เป็นกระบวนการอัตโนมัติที่ช่วยดำเนินการศึกษาโดยตรงในวันที่ทำการวิเคราะห์ ความเร็วนี้ทำให้คนไม่ต้องกังวลกับผลลัพธ์เป็นเวลานานและถึงมือเขาในเวลาไม่กี่วัน
3. ความไวสูง. การทดสอบทำให้สามารถตรวจสอบการทำงานของไวรัสได้แม้ในช่วงระยะฟักตัวเมื่อมีความเข้มข้นต่ำมาก ซึ่งจะช่วยป้องกันการเกิดกระบวนการทางพยาธิวิทยาและเริ่มการรักษาอย่างทันท่วงที
4. ความเป็นไปได้ของการวิเคราะห์หลาย ๆ ครั้งในคราวเดียว จากการเก็บตัวอย่างเลือดเพียงครั้งเดียว การวินิจฉัยสามารถวินิจฉัยโรคได้หลายโรคในคราวเดียว ตัวอย่างเช่น คุณสามารถพร้อมกันได้เพื่อระบุสาเหตุของโรคหนองในและหนองในเทียม ในขณะเดียวกัน ขั้นตอนนี้จะไม่สามารถส่งผลเสียต่อความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ได้

ข้อบกพร่องของการศึกษา

แม้ว่าการวิเคราะห์นี้จะมีความนิยมและการให้ข้อมูลที่ดี แต่ก็มีแง่ลบบางประการของการวินิจฉัย PCR สำหรับ HPV หัวหน้ากลุ่มคนเหล่านี้มีโอกาสเกิดผลบวกที่ผิดพลาด สิ่งนี้เกิดขึ้นเมื่อทำการบำบัดแล้วการติดเชื้อถูกทำลาย แต่เซลล์ไวรัสที่ตายแล้วยังคงอยู่ในเนื้อเยื่อของร่างกาย การต่ออายุเซลล์ต้องใช้เวลาพอสมควร หากคุณทำการศึกษาเร็วกว่า 2-3 เดือนหลังการรักษา PCR อาจแสดงผลในเชิงบวก เทคนิคนี้ไม่สังเกตเห็นความแตกต่างใดๆ เนื่องจากมีวัตถุประสงค์เพื่อค้นหา DNA ของไวรัส ซึ่งสามารถพบได้แม้ในเซลล์ที่ตายแล้ว สิ่งนี้มีส่วนทำให้เกิดผลลัพธ์ที่เป็นเท็จ สถานการณ์นี้สามารถหลีกเลี่ยงได้หากทำการทดสอบในห้องปฏิบัติการภายในกรอบเวลาที่กำหนดโดยแพทย์ที่เข้าร่วม

ถอดเสียง

การถอดรหัส PCR สำหรับ HPV จะแสดงอะไร

หมอควรแปลผลตรวจนะคะ แต่ยังเป็นสิ่งสำคัญสำหรับผู้ป่วยที่จะต้องทราบโครงสร้างของใบผลลัพธ์ หากการวิเคราะห์ระบุว่า "ตรวจไม่พบ DNA" แสดงว่าไม่มีไวรัส papilloma ในเลือด หากตัวบ่งชี้ Lg มีค่าเท่ากับ 5 หรือมากกว่า แสดงว่ามีความเข้มข้นสูงในเลือด Lg 3-5 - ปริมาณที่มีนัยสำคัญ น้อยกว่า 3 - ปริมาณที่ไม่มีนัยสำคัญ

การวิเคราะห์เชิงลบที่ผิดพลาด

ยังการวิเคราะห์เท็จเชิงลบอาจเกิดขึ้น มันเกิดขึ้นถ้า:

• วัสดุชีวภาพที่เก็บรวบรวมถูกจัดเก็บหรือขนส่งอย่างไม่เหมาะสม
• สภาพปลอดเชื้อถูกละเมิด และจุลินทรีย์อื่น ๆ เข้าไปในเลือดที่ได้รับของผู้ป่วย
• เนื่องจากรีเอเจนต์ไม่เหมาะสม

เพื่อขจัดความเป็นไปได้ที่จะเกิดผลลบที่ผิดพลาด จำเป็นต้องเลือกห้องปฏิบัติการที่ได้รับอนุมัติพร้อมบุคลากรที่มีคุณสมบัติสูงสำหรับการวิเคราะห์นี้

เราตรวจสอบอย่างละเอียดว่าทำไมจึงทำการวินิจฉัย PCR มันชัดเจนแค่ไหน