การวิจัยทางแบคทีเรียคืออะไร? เป็นไปตามโครงการอะไร? ความปลอดภัยในกรณีนี้หมายถึงอะไร? เป้าหมายและขั้นตอนของการวิจัยแบคทีเรียคืออะไร
ข้อมูลทั่วไป
การตรวจทางแบคทีเรียเป็นกระบวนการทางวิทยาศาสตร์ที่มีการระบุแบคทีเรียและศึกษาคุณสมบัติของแบคทีเรียเพื่อทำการวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา สิ่งที่สำคัญอย่างยิ่งในที่นี้คือการกำหนดประเภทหรือชนิดของจุลินทรีย์ที่เกิด (โดยนัยคือวัฒนธรรมบริสุทธิ์) นี้มาพร้อมกับการศึกษาคุณสมบัติทางชีวเคมีและสรีรวิทยาของสิ่งมีชีวิตตลอดจนแนวโน้มที่จะเกิดสารพิษ เพื่อจุดประสงค์เหล่านี้ ปฏิกิริยาการตกตะกอนและการเกาะติดกันถูกใช้ นอกจากนี้ยังฝึกให้สัตว์ทดลองติดเชื้อด้วยการตรวจหาการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาในภายหลัง
การทำงานกับสื่อทดสอบ
อัลกอริธึมการศึกษาทางแบคทีเรียให้ปฏิบัติตามคำแนะนำพิเศษอย่างเคร่งครัด ดังนั้นวัสดุที่ใช้ทดสอบจะต้องเก็บในจานปลอดเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ ยังต้องดูแลเพื่อให้จัดส่งไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุด ควรเก็บตัวอย่างเย็น เทคนิคการวิจัยแบคทีเรียมีไว้เพื่อสถานการณ์ที่เป็นไปได้มากมาย ดังนั้น ประเภทของวัตถุ คุณสมบัติของจุลินทรีย์ และลักษณะของโรคจึงมักทำให้จำเป็นต้องพัฒนาคำแนะนำในการทำงานเป็นรายบุคคล มีการใช้วิธีการต่างๆ มากมายในการทำงาน หนึ่งที่พบบ่อยที่สุดคือการตรวจทางแบคทีเรีย แต่ถ้าแบคทีเรียไม่ได้รับการแก้ไขก็จะใช้หยดที่บดหรือห้อย ควรสังเกตว่าสองตัวเลือกสุดท้ายมีลักษณะเป็นโรคติดต่อที่เพิ่มขึ้น
แบคทีเรีย
ในกรณีนี้ จะใช้สโตรก ในการสร้างคุณต้องแจกจ่ายของเหลวที่กำลังศึกษาอยู่บนพื้นผิวของสไลด์แก้ว ซาเทสควรทำให้แห้ง มักทำได้โดยการเคลื่อนย้ายยาผ่านเปลวไฟที่ได้จากเตาแก๊ส แม้ว่าจะใช้สารยึดติดแทนก็ได้ เพื่อระบุว่าได้ดำเนินการเตรียมการด้วยการเตรียมการนี้แล้วจะมีการย้อมสี จุดประสงค์ของการจัดการดังกล่าวคือความแม่นยำ ซึ่งสำคัญมากเมื่อทำการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์และแบคทีเรีย ท้ายที่สุด ถ้าคุณใช้ยาซ้ำเพื่อจุดประสงค์อื่น คุณจะได้โจ๊ก ซึ่งจะทำงานอย่างมีประสิทธิภาพยากมาก
ทำไมการทำสำเนาแบคทีเรียจึงเป็นที่นิยม
ไม่น้อยเพราะวิธีนี้ใช้ได้ หากมีการศึกษาทางแบคทีเรียของการเตรียมการที่สดใหม่เพื่อตรวจหาเชื้อโรคสามารถใช้ปฏิกิริยาจุลภาคหรือการย้อมสีแบบเฉพาะเจาะจงของชิ้นส่วนโครงสร้างต่างๆ ของจุลินทรีย์ได้ อันไหนดีกว่า? ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำยิ่งขึ้นเมื่อทำงานกับการเตรียมสี ในกรณีนี้ จะใช้วัสดุทดสอบกับสไลด์แก้วที่เตรียมไว้แล้ว และให้แน่ใจว่าชั้นบาง (และถ้าเป็นไปได้) หลังจากนั้นคุณต้องรอจนกว่ายาจะแห้งในอากาศ จากนั้นจุลินทรีย์จะได้รับการแก้ไขโดยใช้วิธีการทั่วไปวิธีใดวิธีหนึ่ง หลังจากนั้นการเตรียมการระบายความร้อนจะต้องย้อมสีด้วยสีที่แตกต่างกันหรือสีธรรมดา สำหรับสิ่งนี้ สามารถใช้การเตรียมแบบแห้งและแบบพื้นเมืองได้ หลังจากนั้นจะยังคงส่งรังสีอัลตราไวโอเลตหรือสีน้ำเงินสั้น ๆ ไปยังที่สะสมของสิ่งมีชีวิต ซึ่งทำให้จุลินทรีย์ทั้งหมดหรือบางส่วนของร่างกายเรืองแสง
การประยุกต์ใช้จริงของแบคทีเรีย
ใช้สำหรับวินิจฉัยโรคติดเชื้อต่างๆ ที่มีชื่อเสียงที่สุดคือวัณโรค โรคหนองใน และไข้กำเริบ นอกจากนี้พวกเขายังใช้การวิจัยเพื่อศึกษาจุลชีพที่ซับซ้อนทั้งหมดของอวัยวะหรือผลิตภัณฑ์ แต่นักวิจารณ์มักจะชี้ไปที่ความไม่น่าเชื่อถือและความไม่ถูกต้องของวิธีนี้
พืชผลและวัฒนธรรมย่อยของวัฒนธรรมแบคทีเรีย
ดำเนินการโดยใช้ปิเปตปาสเตอร์ การตรวจทางแบคทีเรียและเซลล์วิทยามักจะทำได้ยากหากไม่มีการเพาะเชื้อและการเพาะเลี้ยงย่อยในระหว่างขั้นตอนการทำงาน เมื่อทำงานกับปิเปตปาสเตอร์ เคล็ดลับของมันแยกออกด้วยแหนบ จากนั้นเครื่องมือจะเคลื่อนผ่านเปลวไฟของเตาแล้วปล่อยให้เย็น โดยวิธีการที่สามารถใช้สารอาหารทั้งของเหลวและของแข็งในการหว่านเมล็ด ทางเลือกได้รับอิทธิพลจากเป้าหมายของการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ในขณะเดียวกันก็จำเป็นต้องปฏิบัติตามอัลกอริทึมของการทำงานและข้อควรระวังด้านความปลอดภัย ดังนั้นเมื่อทำงานกับสารอาหารที่เป็นของเหลว จำเป็นต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าสารนั้นไม่หกออกและไม่ทำให้ขอบจุกและหลอดทดลองเปียก เมื่อทำการศึกษาด้วยวัสดุที่เป็นของแข็ง มักใช้เข็มพิเศษเพื่อเข้าสู่วัฒนธรรม เมื่อทำการหว่านและหว่านเมล็ดซ้ำควรดำเนินการใกล้เปลวไฟของเตาแก๊ส เพื่อความบริสุทธิ์ของการทดลอง ไม่ควรเปิดหลอดทดลองเป็นเวลานาน สำหรับเครื่องมือที่มีวัฒนธรรม: คุณควรตรวจสอบให้แน่ใจว่าไม่ได้สัมผัสอะไร นอกจากนี้ เทคนิคการวิจัยแบคทีเรียยังช่วยให้ขอบหลอดทดลองไหม้ก่อนปิด ผลิตภัณฑ์สำเร็จรูปควรลงนามทันทีหลังการผลิตเพื่อหลีกเลี่ยงความสับสนในอนาคต
ประสิทธิภาพการหว่าน
เชื่อกันว่าวิธีนี้ช่วยให้ได้ข้อมูลที่ถูกต้องและเชื่อถือได้มากขึ้นในระหว่างการวินิจฉัยทางแบคทีเรียมากกว่าการส่องกล้องทางแบคทีเรียก่อนหน้านี้ ในกรณีนี้ อัลกอริทึมของการกระทำจะเป็นดังนี้:
- ในขั้นต้น วัฒนธรรมบริสุทธิ์จะถูกป้ายบนพื้นผิวของสารอาหาร ซึ่งถูกเทลงในจานเพาะเชื้อ
- การหว่านเบื้องต้นควรทำในสภาพที่เอื้ออำนวยต่อสายพันธุ์จุลินทรีย์
- หลังจากวันหรือสองวัน ในสภาพแวดล้อมที่เหมาะสม อาณานิคมที่เหมาะสมทั้งหมดจะย้ายไปยังที่ที่พวกมันสามารถพัฒนาได้สูงสุด ซึ่งทำให้เป็นอิสระจากจุลินทรีย์ภายนอก
ผลลัพธ์ที่ได้คือการเพาะเชื้อแบคทีเรียที่เป็นเนื้อเดียวกันที่สามารถระบุได้
วัฒนธรรมบริสุทธิ์
แต่มันทำได้ยังไง? ด้วยเหตุนี้จึงใช้วิธีการทางชีวภาพและทางกล ในกรณีแรกสื่อสารอาหารมีบทบาทอย่างมากซึ่งมีเงื่อนไขที่จำเป็นซึ่งเอื้ออำนวยต่อการพัฒนาวัฒนธรรมเฉพาะ นอกจากนี้ยังสามารถใช้วิธีการนี้เมื่อสัตว์ทดลองที่ไวต่อแบคทีเรียบางชนิดติดเชื้อได้ วิธีการทางกลขึ้นอยู่กับการใช้เครื่องมือปลอดเชื้อ โดยที่วัฒนธรรมจะถูกวางไว้ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่อยู่ในจานเพาะเชื้อที่หนึ่ง ที่สอง และสาม จากนั้นจึงจำเป็นต้องรอจนกว่าอาณานิคมแต่ละแห่งจะเติบโตและวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์จะโดดเด่นกว่าพวกเขา แบคทีเรียสามารถเจริญเติบโตได้ในเทอร์โมสแตทพิเศษ โดยจะรักษาอุณหภูมิไว้ที่ระดับหนึ่ง (โดยปกติประมาณ 37 องศา) ในกรณีนี้ กระบวนการจะดำเนินต่อไปประมาณหนึ่งวัน แต่อาจมีการกำหนดเงื่อนไขอื่นขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์ สิ่งสำคัญคือการมีความเข้มข้นของออกซิเจนที่ต้องการ เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้ใช้วิธีการเติมอากาศต่างๆ จนถึงตอนนี้ เราได้พูดถึงสถานการณ์โดยรวมและโดยทั่วไปแล้ว แต่ตอนนี้ เรามาให้ความสนใจกับโครงการวิจัยแบคทีเรียวิทยากันดีกว่า
ฝึกหัด
มักใช้ชุดวิธีการตรวจหาจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในร่างกายของผู้ป่วยหรือผู้ที่อาจเป็นพาหะ วัสดุและวิธีการที่ใช้ขึ้นอยู่กับเป้าหมายของการวิเคราะห์ตลอดจนเงื่อนไขของสภาพแวดล้อมในการทำงาน ในทางปฏิบัติ แบคทีเรียส่วนใหญ่มักตรวจพบจากการเพาะเลี้ยงเลือดจากบุคคลหรือสัตว์ หากมีการระบุรอยโรคเฉพาะที่ ก็สามารถค้นหาเชื้อโรคได้ในพื้นที่ที่มีปัญหา ซึ่งเป็นเรื่องปกติสำหรับโรคต่างๆ เช่น โรคบิด โรคหนองใน โรคคอตีบ และอื่นๆ ที่คล้ายกัน ในกรณีที่รุนแรงโดยเฉพาะอย่างยิ่ง กระบวนการนี้จะแบ่งออกเป็นขั้นตอนต่าง ๆ ของการตรวจแบคทีเรีย (ซึ่งเป็นเรื่องปกติสำหรับไข้ไทฟอยด์) แต่ละคนใช้วิธีการของตนเองซึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อค้นหาสาเหตุของการติดเชื้อ มาดูสถานการณ์ไข้ไทฟอยด์กันดีกว่า ในสัปดาห์แรกของการเกิดโรค วิธีการวินิจฉัยโรคที่น่าเชื่อถือที่สุดคือการเพาะเชื้อในเลือด ประการที่สอง การศึกษาทางซีรั่มวิทยาก็ถือเป็นเรื่องดังกล่าว ในสัปดาห์ที่สามตรวจอุจจาระ วิธีสุดท้ายถือเป็นการเช็คระยะพักฟื้น
การระบุจุลินทรีย์
เริ่มตั้งแต่ขั้นตอนการย้อม จากนั้นพวกเขามองว่าแบคทีเรียสามารถย่อยสลายคาร์โบไฮเดรต กรดอะมิโน และอื่นๆ ได้อย่างไร นอกจากนี้ กระบวนการนี้สามารถเสริมด้วยการศึกษาคุณสมบัติอื่นๆ ที่แต่ละสกุลหรือชนิดของจุลินทรีย์มีอยู่ ตัวอย่างเช่นควรให้ความเป็นไปได้ในการละลายเม็ดเลือดแดงของสัตว์ต่าง ๆ ผลต่อการแข็งตัวของเลือดในพลาสมาและการละลายของก้อนไฟบรินและอื่น ๆ ทั้งหมดนี้เป็นคุณสมบัติที่แตกต่างของตัวแทนแต่ละคนของไมโครเวิร์ล นอกจากนี้ การระบุทางซีรัมวิทยายังสามารถใช้เพื่อการรับรู้ขั้นสุดท้าย (แต่มักเกี่ยวข้องกับแบคทีเรียก่อโรคที่เป็นของตระกูลลำไส้)
สรุป
ควรสังเกตว่าจุลินทรีย์จำนวนหนึ่งไม่สามารถระบุได้ด้วยวิธีการที่อธิบายไว้ในบทความ ในกรณีนี้ แนวปฏิบัติในการแพร่เชื้อในสัตว์ทดลองถูกใช้อย่างแพร่หลาย การคำนวณทำขึ้นจากข้อเท็จจริงที่ว่าลักษณะความเป็นพิษหรือการเกิดโรคจะปรากฏขึ้นซึ่งไม่ได้สังเกตภายใต้เงื่อนไขเทียม การติดเชื้อยังสามารถใช้เป็นวิธีการสำหรับการสะสมของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค และเมื่อเปรียบเทียบลักษณะของวัฒนธรรมที่ศึกษาซึ่งพบในกระบวนการศึกษาคุณสมบัติทางชีววิทยา สัณฐานวิทยา เซรุ่มวิทยา และชีวเคมี เราสามารถพูดได้ว่าเรารู้ว่าเรากำลังจัดการกับจุลินทรีย์ชนิดใด การระบุหมายถึงการบ่งชี้สกุล ชนิด และชนิดของแบคทีเรีย หากจุลินทรีย์ภายใต้การศึกษาเบี่ยงเบนในคุณสมบัติบางอย่างจากลักษณะทั่วไป จะต้องระบุสิ่งนี้ ผู้เชี่ยวชาญจำนวนหนึ่งเชื่อว่าในกรณีเช่นนี้ การระบุซ้ำด้วยวิธีการและเทคนิคทั้งหมดที่ใช้ซ้ำจะเป็นประโยชน์ บางครั้งการวิจัยสามารถนำไปสู่ระดับถัดไป ซึ่งต้องใช้วิธีการที่จริงจังกว่า (และมีค่าใช้จ่ายสูงกว่า) หากได้ผลลัพธ์เชิงลบแสดงว่าการเตรียมการจุลินทรีย์ขาดหายไปหรือไม่มีชีวิต แต่เพื่อความถูกต้องของการวิจัย หากสงสัยว่าเป็นพาหะของบาซิลลัสจำนวนหนึ่ง (โรคบิด โรคคอตีบ ไข้ไทฟอยด์) การตรวจสอบซ้ำจะแสดงในกรณีดังกล่าว นี่เป็นสิ่งจำเป็นเพื่อให้ผู้เชี่ยวชาญมีความคิดที่ถูกต้องเกี่ยวกับสิ่งที่พวกเขาต้องรับมือ
