การศึกษาแบคทีเรียมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อมนุษย์ จนถึงปัจจุบัน มีการค้นพบโปรคาริโอตจำนวนมาก ซึ่งแตกต่างกันในด้านการก่อโรค พื้นที่กระจาย รูปร่าง ขนาด จำนวนแฟลกเจลลา และพารามิเตอร์อื่นๆ เพื่อศึกษาสายพันธุ์นี้อย่างละเอียด จะใช้วิธีการวิจัยทางแบคทีเรีย
วิธีการวิเคราะห์เซลล์แบคทีเรียมีอะไรบ้าง
เพื่อตรวจสอบว่าแบคทีเรียก่อโรคหรือไม่ มีการตรวจสอบวัฒนธรรมด้วยวิธีต่างๆ ในหมู่พวกเขา:
1. วิธีแบคทีเรีย
2. วิธีการทางแบคทีเรีย
3. วิธีทางชีวภาพ
วิธีการวิจัยทางแบคทีเรียและแบคทีเรียนั้นอาศัยการทำงานกับเซลล์โปรคาริโอตโดยตรง เมื่อจำเป็นต้องมีการวิเคราะห์ทางชีววิทยาเพื่อศึกษาผลกระทบของเซลล์ดังกล่าวต่อสิ่งมีชีวิตของสัตว์ทดลอง ตามระดับของการรวมตัวของสัญญาณบางอย่างของโรคที่นักวิทยาศาสตร์สามารถทำได้ข้อสรุปเกี่ยวกับการมีอยู่หรือไม่มีของแบคทีเรียก่อโรคในตัวอย่าง รวมถึงการแพร่พันธุ์ตามธรรมชาติในร่างกายของสัตว์เพื่อให้ได้วัฒนธรรมและนำไปใช้ในงานอื่นๆ
วิธีวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาแตกต่างจากวิธีแบคทีเรีย ในตอนแรก วัฒนธรรมของโปรคาริโอตที่มีชีวิตที่เตรียมมาเป็นพิเศษใช้สำหรับการวิเคราะห์ ในขณะที่ในครั้งที่สอง งานจะดำเนินการกับเซลล์ที่ตายแล้วหรือเซลล์ที่มีชีวิตบนสไลด์แก้ว
ขั้นตอนของวิธีวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา จุลชีววิทยา
หลักการศึกษาคุณสมบัติของการเพาะเชื้อแบคทีเรียมีประโยชน์ทั้งสำหรับนักจุลชีววิทยาที่ตั้งเป้าหมายในการศึกษาเซลล์โปรคาริโอต และสำหรับช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการที่มีหน้าที่สร้างเชื้อโรคหรือไม่ทำให้เกิดโรคของแบคทีเรีย และ แล้ววินิจฉัยผู้ป่วย
วิธีการศึกษาแบคทีเรียแบ่งออกเป็นสามขั้นตอน:
1. การแยกแบคทีเรียออกจากตัวอย่างเดิม
2. เพาะเชื้อแบคทีเรียและปลูกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ศึกษาคุณสมบัติของมัน
3. การศึกษาเซลล์แบคทีเรียโดยละเอียด
สเตจแรก
ตัวอย่างหรือ smear นำมาจากพื้นผิวที่ว่างของตัวกลางหรือจากตัวผู้ป่วย ดังนั้นเราจึงได้ "ค็อกเทล" ของแบคทีเรียหลายชนิดที่ต้องหว่านบนอาหารที่มีสารอาหาร บางครั้งก็เป็นไปได้ที่จะแยกแบคทีเรียที่จำเป็นทันทีโดยรู้จุดโฟกัสของการกระจายในร่างกาย
หลังจากสองหรือสามวัน อาณานิคมที่ต้องการจะถูกเลือกและถูกหว่านลงบนสื่อที่เป็นของแข็งของจานเพาะเชื้อโดยใช้ห่วงปลอดเชื้อ ห้องปฏิบัติการหลายแห่งทำงานร่วมกับหลอดทดลอง ซึ่งสามารถบรรจุสารอาหารที่เป็นของแข็งหรือของเหลวได้ นี่คือวิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาทางจุลชีววิทยา
สเตจที่สอง
หลังจากได้รับแบคทีเรียแต่ละโคโลนีแล้ว จะทำการวิเคราะห์มาโครโดยตรงและจุลภาค วัดค่าพารามิเตอร์ทั้งหมดของอาณานิคมโดยกำหนดสีและรูปร่างของแต่ละค่า ไม่ใช่เรื่องแปลกที่จะนับโคโลนีบนจานเพาะเชื้อและจากนั้นในวัสดุเริ่มต้น นี่เป็นสิ่งสำคัญในการวิเคราะห์แบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรค ซึ่งจำนวนนั้นขึ้นอยู่กับระดับของโรค
วิธีวิจัยทางแบคทีเรีย ขั้นตอนที่ 2 คือการศึกษาอาณานิคมของจุลินทรีย์แต่ละตัว สามารถเชื่อมโยงกับวิธีทางชีววิทยาในการวิเคราะห์แบคทีเรียได้ เป้าหมายอีกประการของการทำงานในขั้นตอนนี้คือการเพิ่มปริมาณของแหล่งข้อมูล สามารถทำได้โดยใช้สารอาหารหรือคุณสามารถทำการทดลองในร่างกายกับสิ่งมีชีวิตทดลองที่มีชีวิต แบคทีเรียก่อโรคจะเพิ่มจำนวนขึ้น และด้วยเหตุนี้ เลือดจะมีเซลล์โปรคาริโอตนับล้านเซลล์ ง่ายต่อการเตรียมวัสดุทำงานที่จำเป็นของแบคทีเรียจากเลือดที่ถ่าย
ด่านที่สาม
ส่วนที่สำคัญที่สุดของการศึกษาวิจัยนี้คือการกำหนดคุณสมบัติทางสัณฐานวิทยา ชีวเคมี สารพิษ และแอนติเจนิกของการเพาะเชื้อแบคทีเรีย งานดำเนินการด้วยวัฒนธรรมที่ทำความสะอาดล่วงหน้าบนอาหารเช่นเดียวกับการเตรียมการ (มักเปื้อน) ภายใต้กล้องจุลทรรศน์
ตั้งความเป็นเจ้าของแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคหรือฉวยโอกาสกับกลุ่มที่เป็นระบบหนึ่งหรือกลุ่มอื่น เช่นเดียวกับการตรวจสอบความต้านทานต่อยา ช่วยให้วิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ระยะที่ 3 - ยาปฏิชีวนะ เช่น การวิเคราะห์พฤติกรรมของเซลล์แบคทีเรียในสภาวะของเนื้อหาของยาในสิ่งแวดล้อม
การศึกษาการดื้อยาปฏิชีวนะในวัฒนธรรมมีความสำคัญอย่างยิ่งเมื่อจำเป็นต้องสั่งจ่ายยาที่จำเป็นและที่สำคัญที่สุดคือยาที่มีประสิทธิภาพสำหรับผู้ป่วยแต่ละราย นี่คือวิธีที่วิธีการวิจัยแบคทีเรียสามารถช่วยได้
สื่อการเติบโตคืออะไร
สำหรับการพัฒนาและการสืบพันธุ์ แบคทีเรียจะต้องอยู่ในสารอาหารที่เตรียมไว้ล่วงหน้า โดยความสม่ำเสมอ พวกเขาสามารถเป็นของเหลวหรือของแข็ง และโดยกำเนิด - ผักหรือสัตว์
ข้อกำหนดของสื่อเบื้องต้น:
1. ปลอดเชื้อ
2. ความโปร่งใสสูงสุด
3. ตัวชี้วัดที่เหมาะสมที่สุดของความเป็นกรด แรงดันออสโมติก การทำงานของน้ำ และค่าทางชีวภาพอื่นๆ
การได้มาซึ่งอาณานิคมโดดเดี่ยว
1. วิธีดรายกัลสกี้ ประกอบด้วยการทารอยเปื้อนด้วยจุลินทรีย์ประเภทต่างๆ กับลูปแบคทีเรีย วงนี้จะถูกส่งต่อไปยังจานเพาะเชื้อจานแรกที่มีสารอาหาร นอกจากนี้โดยไม่ต้องเปลี่ยนลูปวิธีการของวัสดุที่เหลือจะดำเนินการในจานเพาะเชื้อที่สองและสาม ดังนั้นในตัวอย่างสุดท้ายของอาณานิคม แบคทีเรียจะไม่ถูกเพาะอย่างหนาแน่นเกินไป ซึ่งจะทำให้ความสามารถในการค้นหาสิ่งที่จำเป็นสำหรับการทำงานง่ายขึ้นแบคทีเรีย
2. วิถีโคช. ใช้หลอดทดลองที่มีสารอาหารหลอมเหลว วางลูปหรือปิเปตที่มีแบคทีเรียเปื้อนหลังจากนั้นจึงเทเนื้อหาของหลอดทดลองลงบนจานพิเศษ วุ้น (หรือเจลาติน) จะแข็งตัวเมื่อเวลาผ่านไป และหาความหนาของเซลล์ที่ต้องการได้ง่าย สิ่งสำคัญคือต้องเจือจางส่วนผสมของแบคทีเรียในหลอดทดลองก่อนเริ่มงาน เพื่อไม่ให้จุลินทรีย์มีความเข้มข้นสูงเกินไป
วิธีวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ซึ่งขั้นตอนขึ้นอยู่กับการแยกวัฒนธรรมที่ต้องการของแบคทีเรีย ไม่สามารถทำได้หากไม่มีสองวิธีนี้ในการค้นหาอาณานิคมที่แยกได้
ยาปฏิชีวนะ
การมองเห็น ปฏิกิริยาของแบคทีเรียต่อยาสามารถเห็นได้ในทางปฏิบัติสองวิธี:
1. วิธีแบบแผ่นกระดาษ
2. เพาะเชื้อแบคทีเรียและยาปฏิชีวนะในอาหารเหลว
วิธีใส่กระดาษทิชชู่ต้องอาศัยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่เติบโตบนอาหารที่มีสารอาหารที่เป็นของแข็ง บนสื่อดังกล่าวให้ใส่กระดาษกลมสองสามแผ่นที่แช่ในยาปฏิชีวนะ หากยาประสบความสำเร็จในการทำให้เป็นกลางของเซลล์แบคทีเรียหลังจากการรักษาดังกล่าวจะมีพื้นที่ที่ปราศจากอาณานิคม หากปฏิกิริยาต่อยาปฏิชีวนะเป็นลบ แบคทีเรียก็จะอยู่รอด
ในกรณีของการใช้สารอาหารที่เป็นของเหลว ขั้นแรกให้เตรียมหลอดทดลองหลายๆ หลอดที่มีแบคทีเรียเจือจางต่างกัน ยาปฏิชีวนะถูกเติมลงในหลอดทดลองเหล่านี้และสังเกตกระบวนการปฏิสัมพันธ์ระหว่างสารกับจุลินทรีย์ในระหว่างวัน เป็นผลให้ได้รับแอนติบอดี้คุณภาพสูงตามที่เป็นไปได้ที่จะตัดสินประสิทธิภาพของยาสำหรับพืชผลที่กำหนด
งานหลักของการวิเคราะห์
นี่คือเป้าหมายและขั้นตอนของวิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา
1. หาวัสดุตั้งต้นที่จะใช้แยกอาณานิคมของแบคทีเรีย อาจเป็นรอยเปื้อนจากพื้นผิวของวัตถุใด ๆ เยื่อเมือกหรือโพรงของอวัยวะมนุษย์ การตรวจเลือด
2. การเพาะปลูกวัฒนธรรมบนอาหารที่เป็นของแข็ง หลังจาก 24-48 ชั่วโมง แบคทีเรียชนิดต่างๆ จะพบอาณานิคมในจานเพาะเชื้อ เราเลือกสิ่งที่คุณต้องการตามเกณฑ์ทางสัณฐานวิทยาและ / หรือชีวเคมีและดำเนินการต่อไป
3. การขยายพันธุ์ของวัฒนธรรมที่เกิด วิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาอาจใช้วิธีการทางกลหรือทางชีววิทยาในการเพิ่มจำนวนการเพาะเชื้อแบคทีเรีย ในกรณีแรก งานจะดำเนินการกับสื่อสารอาหารที่เป็นของแข็งหรือของเหลว ซึ่งแบคทีเรียจะทวีคูณในเทอร์โมสตัทและสร้างอาณานิคมใหม่ วิธีการทางชีววิทยาต้องการสภาวะทางธรรมชาติในการเพิ่มจำนวนแบคทีเรีย ดังนั้นที่นี่สัตว์ทดลองจึงติดเชื้อจุลินทรีย์ หลังจากผ่านไปสองสามวัน โปรคาริโอตจำนวนมากจะสามารถพบได้ในตัวอย่างเลือดหรือสเมียร์
4. การทำงานกับวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ เพื่อตรวจสอบตำแหน่งที่เป็นระบบของแบคทีเรียตลอดจนของที่เป็นของเชื้อโรค จำเป็นต้องทำการวิเคราะห์เซลล์อย่างละเอียดตามลักษณะทางสัณฐานวิทยาและชีวเคมี เมื่อศึกษากลุ่มจุลินทรีย์ก่อโรค สิ่งสำคัญที่ต้องรู้ยาปฏิชีวนะมีประสิทธิภาพเพียงใด
นี่เป็นลักษณะทั่วไปของวิธีวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา
คุณสมบัติของการวิเคราะห์
กฎหลักของการวิจัยทางแบคทีเรียคือปลอดเชื้อสูงสุด หากคุณกำลังทำงานกับหลอดทดลอง วัฒนธรรมและวัฒนธรรมย่อยของแบคทีเรียควรดำเนินการโดยใช้โคมไฟสปิริตที่ให้ความร้อนเท่านั้น
วิธีการวิจัยแบคทีเรียทุกขั้นตอนต้องใช้ลูปพิเศษหรือปิเปตปาสเตอร์ เครื่องมือทั้งสองต้องได้รับการบำบัดล่วงหน้าด้วยเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์ สำหรับปิเปตปาสเตอร์ ที่นี่ ก่อนการฆ่าเชื้อด้วยความร้อน จำเป็นต้องแยกปลายปิเปตออกด้วยแหนบ
เทคนิคการเพาะเชื้อแบคทีเรียก็มีลักษณะเฉพาะของตัวเองเช่นกัน ขั้นแรก เมื่อเพาะเชื้อบนสื่อที่เป็นของแข็ง แบคทีเรียจะวนรอบพื้นผิวของวุ้น แน่นอนว่าวงควรมีตัวอย่างจุลินทรีย์อยู่บนพื้นผิวอยู่แล้ว นอกจากนี้ยังมีการฝึกฉีดวัคซีนในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย ซึ่งในกรณีนี้ ห่วงหรือปิเปตควรไปถึงด้านล่างของจานเพาะเชื้อ
เมื่อทำงานกับสื่อของเหลว จะใช้หลอดทดลอง สิ่งสำคัญคือต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าของเหลวไม่สัมผัสกับขอบของเครื่องแก้วหรือจุกในห้องปฏิบัติการ และเครื่องมือที่ใช้ (ปิเปต, ห่วง) จะไม่สัมผัสวัตถุและพื้นผิวแปลกปลอม
ความสำคัญของวิธีวิจัยทางชีววิทยา
การวิเคราะห์ตัวอย่างแบคทีเรียมีการใช้งานจริง เป็นหลักวิธีการวิจัยทางแบคทีเรียสามารถนำไปใช้ในทางการแพทย์ได้ ตัวอย่างเช่น จำเป็นต้องศึกษาจุลชีพของผู้ป่วยเพื่อสร้างการวินิจฉัยที่ถูกต้อง ตลอดจนพัฒนาแนวทางการรักษาที่ถูกต้อง แอนติบอดี้ช่วยที่นี่ ซึ่งจะแสดงกิจกรรมของยาที่ต่อต้านเชื้อโรค
วิเคราะห์แบคทีเรียในห้องปฏิบัติการเพื่อตรวจหาโรคอันตราย เช่น วัณโรค ไข้กำเริบ หรือโรคหนองใน นอกจากนี้ยังใช้ศึกษาองค์ประกอบแบคทีเรียของต่อมทอนซิล โพรงของอวัยวะ
วิธีวิจัยทางแบคทีเรียสามารถนำมาใช้เพื่อตรวจสอบการปนเปื้อนของสิ่งแวดล้อม จากข้อมูลขององค์ประกอบเชิงปริมาณและคุณภาพของรอยเปื้อนจากพื้นผิวของวัตถุ จะกำหนดระดับประชากรของสภาพแวดล้อมนี้โดยจุลินทรีย์
