ไวรัสตับอักเสบซีคือการติดเชื้อในตับที่เกิดจากไวรัส Flaviviridae HCV ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุล RNA อย่างน้อยหนึ่งโมเลกุล ตามกฎแล้วจะมีการใช้มาตรการวินิจฉัยหลายชุดเพื่อสร้างไวรัสตับอักเสบซีในผู้ป่วย PCR คือการวิเคราะห์ที่ยืนยันการวินิจฉัยได้อย่างถูกต้อง แพทย์มักจะให้ข้อสรุปเมื่อผู้ป่วยมีสัญญาณแรกของโรคอยู่แล้ว
ไวรัสตับอักเสบซีคืออะไร
ความเสียหายของตับจากการติดเชื้อไวรัสที่ส่งผ่านทางเลือดหรือการสัมผัสทางเพศสัมพันธ์ ทางการแพทย์เรียกว่า ไวรัสตับอักเสบซี สาเหตุเชิงสาเหตุคือไวรัสที่ประกอบด้วย RNA ของสารติดเชื้อที่ไม่ใช่เซลล์ของตระกูล Flaviviridae การติดเชื้อสามารถอยู่ในร่างกายได้นานโดยไม่แสดงตัว ดังนั้นเฉพาะเมื่อตรวจพบจุลินทรีย์โดยใช้การตรวจเลือดโดยใช้ PCR RNA RNA ไวรัสตับอักเสบซี (ตามการวินิจฉัย) จะถือว่าสมเหตุสมผล
Flavivirus ไม่ได้ผลิตในเซลล์ที่แยกจากกันที่โตแบบเทียม ในกระบวนการสืบพันธุ์ เชื้อจะสร้างการเปลี่ยนแปลงทางภูมิคุ้มกันที่แตกต่างกัน ปัจจัยเหล่านี้ขัดขวางไม่ให้ร่างกายให้การตอบสนองการป้องกันที่เหมาะสม และผู้เชี่ยวชาญกำลังประสบปัญหาในการพัฒนาวัคซีนที่มีประสิทธิภาพ
ไวรัสถูกส่งผ่านทางหลอดเลือด สำหรับการติดเชื้อต้องเข้าสู่กระแสเลือดในปริมาณที่เพียงพอโดยตรง
การตรวจไวรัสตับอักเสบซีมีอะไรบ้าง
พยาธิสภาพของตับได้รับการวินิจฉัยโดยใช้การตรวจทางห้องปฏิบัติการ การศึกษาทางคลินิกของโรคตับอักเสบซีดำเนินการโดยศึกษาแอนติเจนหรือสารประกอบโปรตีน (แอนติบอดี) ต่างประเทศและที่เป็นอันตรายในวัสดุชีวภาพของผู้ป่วยโดยส่วนใหญ่อยู่ในเลือด
- เอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์ (ELISA). วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับการตรวจหาแอนติบอดี lgM ในเลือด อิมมูโนโกลบูลินถือว่าใหญ่ที่สุดและเป็นเพนทาเมอร์ มันแสดงออกในการตอบสนองการป้องกันเบื้องต้นของลิมโฟไซต์ต่อสารแปลกปลอมที่ไม่รู้จัก
- Radioimmunoassay (RIA) - การกำหนดเชิงปริมาณของ lgM immunoglobulin โดยใช้ไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีของไอโอดีนที่ติดฉลาก
- PCR ของไวรัสตับอักเสบซี - การกำหนด RNA ของไวรัสในวัสดุชีวภาพ (เลือด) การวิเคราะห์นี้ยืนยันการวินิจฉัยได้อย่างน่าเชื่อถือ
การทดสอบ IgG ไม่น่าเชื่อถือ การปรากฏตัวของมันในซีรั่มในเลือดสามารถบ่งบอกถึงการมีอยู่ของไวรัสฟลาวิไวรัส แต่ยังรวมถึงการติดเชื้อในอดีตที่มีเชื้อก่อโรคเดียวกันอีกด้วย
อะไรเป็นตัวกำหนดการวิเคราะห์ PCR
ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ขึ้นอยู่กับการระบุบริเวณ DNA ที่จำเพาะสำหรับเชื้อโรคบางชนิดในตัวอย่างวัสดุสำหรับการวิจัย (เยื่อบุผิว เลือด)การวิเคราะห์ทำให้สามารถระบุสิ่งมีชีวิตที่เล็กที่สุดที่ทำให้เกิดโรค (ไวรัส) ได้โดยการตรวจจับอาร์เอ็นเอหรือดีเอ็นเอของพวกมันในวัสดุชีวภาพ
ห้องปฏิบัติการเพื่อตรวจหาแอนติบอดี PCR ไวรัสตับอักเสบซีดำเนินการใน 3 ขั้นตอน:
- เลือก วัสดุชีวภาพที่ทำการศึกษานั้นถูกทำให้บริสุทธิ์จากสิ่งเจือปนและได้ DNA ในระยะเคลื่อนที่ของคอลัมน์โครมาโตกราฟี
- กำลังขยาย. การวิเคราะห์ดำเนินการในวงจรตัวควบคุมอุณหภูมิอุปกรณ์ มันให้ความร้อนและทำให้หลอดทดลองเย็นลงด้วยวัฏจักรที่แน่นอน สำหรับการศึกษาหนึ่งครั้ง ดำเนินการมากถึง 35 รอบ ผลที่ได้คือจำนวนชิ้นส่วน DNA ที่เพียงพอต่อการตรวจจับ ระบุ และประเมินเชื้อโรค
- อิเล็กโทรโฟเรซิส. ชิ้นส่วนที่เป็นผลลัพธ์จะถูกวางในเจลที่มีความอิ่มตัวของ agarose ต่างกันและดำเนินการอิเล็กโตรโฟรีซิส อิเล็กโตรฟีโรแกรมที่ได้จะถูกวิเคราะห์บนคอมพิวเตอร์
ไม่เพียงแต่ใช้การศึกษา PCR มาตรฐานเท่านั้น แต่ยังใช้การวิเคราะห์ PCR แบบเรียลไทม์ด้วย นี่คือการวินิจฉัยตามเวลาจริง วิธีนี้ช่วยให้สามารถวิเคราะห์เชิงคุณภาพและเชิงปริมาณซึ่งทำให้สามารถระบุการก่อตัวและการเปลี่ยนแปลงของโรคได้ตลอดจนกำหนดการบำบัดเพื่อขจัดสาเหตุของต้นกำเนิดของพยาธิวิทยา PCR แบบเรียลไทม์ยังใช้เพื่อกำหนดวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ของสารติดเชื้อ (genotyping)
การทดสอบปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสทำอย่างไร
สำหรับการวินิจฉัย สามารถใช้ของเหลวทางชีววิทยาของมนุษย์ได้ วัสดุชีวภาพสำหรับตรวจหาไวรัสตับอักเสบซีมักเป็นเลือด
เก็บตัวอย่างเพื่อการวินิจฉัยในขั้นตอนต่อไปสำนักงาน. หากต้องการเจาะเลือด ให้ใช้หลอดทดลองแบบใช้แล้วทิ้งที่มีสารยับยั้งการแข็งตัวของเลือด กิจกรรมที่เน้นการป้องกันการแพร่กระจายของเชื้อโรคช่วยหลีกเลี่ยงการเข้ามาของจุลินทรีย์อีกสายพันธุ์จากภายนอก
เลือดสำหรับ PCR ของโรคตับอักเสบซีในตอนเช้าในขณะท้องว่าง ตัวอย่างจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการทันที อนุญาตให้เก็บวัสดุชีวภาพที่อุณหภูมิ +4 ถึง +8 องศาเซลเซียส ภาชนะบรรจุมีการติดฉลากและระบุทิศทาง ผลการทดสอบมีให้ภายใน 48 ชั่วโมง บางครั้งอาจเร็วกว่านั้น
ประเภทของ PCR
ช่วงของการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสค่อนข้างกว้าง ผู้ติดเชื้อกำหนดโดยใช้ PCR ไวรัสตับอักเสบบี โรคติดต่อจากแมลงดูดเลือด โรคเอดส์ วัณโรค ในด้านเนื้องอกวิทยาโดยใช้วิธีนี้ จะตรวจพบเซลล์เนื้องอกในระยะเริ่มต้น
การวิเคราะห์มีประมาณสิบสี่ประเภท การใช้ประเภทใดประเภทหนึ่งขึ้นอยู่กับขอบเขตและผลการวิเคราะห์ขั้นสุดท้าย PCR บางประเภทจำเป็นสำหรับผลลัพธ์ที่ต้องการภายใน 20 นาที
ในการวินิจฉัยไวรัสตับอักเสบซี ใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส 3 ประเภท:
- การประเมินคุณภาพอาจเป็นบวก แสดงว่ามีการติดเชื้อในร่างกาย หรือเป็นลบ แสดงว่าไม่มีไวรัสฟลาวิ
- PCR แบบเรียลไทม์ (การวิเคราะห์เชิงปริมาณ) - กำหนด RNA เชิงปริมาณของเชื้อโรคใน IU/ml.
- จีโนไทป์เป็นการวิเคราะห์ที่เปิดเผยประเภท (จีโนไทป์) ของไวรัส
เพื่อระบุและระบุโรคได้อย่างแม่นยำ ตามด้วยการศึกษาทั้งสามประเภทใช้เพื่อกำหนดการรักษาที่เหมาะสม
การวิเคราะห์ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเชิงคุณภาพ
การวิเคราะห์เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับทุกคนที่มี ELISA ที่ตรวจพบแอนติบอดีต่อ HCV PCR เชิงคุณภาพสำหรับไวรัสตับอักเสบซีคือการทดสอบความไวต่อมาตรฐาน วิธีการนี้มีจุดมุ่งหมายเพื่อการตรวจจับเท่านั้น ไม่มีการนับหรือแยกสารอื่นๆ
ในการตรวจหาแอนติบอดี ระบบทดสอบพิเศษจะใช้เกณฑ์ความไวอย่างน้อย 50 IU/มล. หากตรวจพบแอนติบอดี การทดสอบอื่นๆ ที่ให้ความกระจ่างจะถูกกำหนด หากผลลัพธ์เป็นลบ จะไม่มีการทดสอบเพิ่มเติม
ในบางกรณี ผลลบที่เป็นเท็จอาจเกิดจากเจ้าหน้าที่ห้องปฏิบัติการที่ไร้ความสามารถหรือน้ำยาคุณภาพต่ำ สำหรับการประกันภัย ควรทำการวิเคราะห์ที่อื่นดีกว่า
PCR เชิงปริมาณ
วิธีนี้ใช้เพื่อศึกษาจำนวนไวรัสฟลาวิไวรัสโดยตรงในวัฏจักรปฏิกิริยาเดียว สำหรับการวัดที่แม่นยำ จะใช้ชิ้นส่วน DNA สำหรับการไฮบริไดเซชันหรือไพรเมอร์ที่ติดฉลากเรืองแสง มีตัวเลือกการตรวจจับที่ประหยัดโดยใช้สีย้อมสีเขียว SYBL สีย้อมถูกตรึงเป็นร่องเล็กๆ ใน DNA และเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินเมื่อฉายรังสีด้วยเลเซอร์
ความเข้มข้นถูกกำหนดโดยเครื่องขยายสัญญาณในรูปแบบดิจิทัล ค่าอาจแตกต่างกันเล็กน้อยระหว่างห้องปฏิบัติการ ดังนั้นควรนำมาเปรียบเทียบกับค่าอ้างอิง
PCR เชิงปริมาณโรคตับอักเสบซีช่วยในการเลือกปริมาณยาที่เหมาะสมและกำหนดระยะเวลาในการรักษา ความถี่ของการศึกษาขึ้นอยู่กับระยะของโรค ชนิดของยีน และขั้นตอนการรักษาที่กำหนด
การกำหนดจีโนไทป์
ไวรัสตับอักเสบซีมีองค์ประกอบทางพันธุกรรมที่แปรปรวน การปรับเปลี่ยนหลายอย่างทำให้ไม่สามารถสร้างวัคซีนได้และยังทำให้การรักษาซับซ้อนอีกด้วย มีการระบุและบันทึกจีโนไทป์ทั้งหมด 11 ยีนและ 100 ชนิดย่อย ในประเทศของอดีตสหภาพโซเวียต ในบุคคลที่ติดเชื้อไวรัสตับอักเสบซี PCR ตรวจพบจีโนไทป์ 1b และ 3 เป็นหลักเป็นหลัก
หากมีจีโนไทป์ใดๆ ก็ตาม ตับแข็งหรือมะเร็งตับสามารถสนุกสนานได้ ด้วยเหตุนี้จึงเป็นสิ่งสำคัญมากในการตรวจหาไวรัสให้ทันเวลา
สำหรับผู้ป่วยบางราย ยาบางชนิดที่ออกแบบมาเพื่อต่อสู้กับไวรัสตับอักเสบซีเป็นพิษ การทำจีโนไทป์ช่วยให้คุณกำหนดประเภทของโปรตีนและสั่งจ่ายยาที่มีประสิทธิภาพ
ในผลการทดสอบการพิมพ์ มีตัวเลขที่มีอักษรละตินตัวพิมพ์เล็กระบุถึงจีโนไทป์ของไวรัส หากตรวจพบ HCV แต่ไม่ได้พิมพ์ แสดงว่าบุคคลนั้นมียีนที่ไม่ปกติสำหรับพื้นที่ทางภูมิศาสตร์บางแห่ง
ผลการวิเคราะห์
หมอต้องถอดรหัสผลลัพธ์ เฉพาะข้อมูลจากการศึกษาหลายชิ้น (ร่วมกับการรำลึกและการตรวจ) เท่านั้นที่สามารถให้ภาพรวมของประวัติทางการแพทย์โดยรวมได้
- ในคนที่มีสุขภาพดี การทดสอบปฏิกิริยาเชิงคุณภาพในวัสดุชีวภาพไม่พบสิ่งใด หากระบุค่า "ตรวจพบ" การติดเชื้อจะได้รับการยืนยันและผู้ป่วยต้องการการวินิจฉัยเพิ่มเติมตามด้วยการรักษา
- การกำหนดจำนวนผู้ติดเชื้อทำให้สามารถประเมินปริมาณไวรัสในร่างกายได้ โดยปกติ PCR เชิงปริมาณไวรัสตับอักเสบซีจะตรวจไม่พบเชื้อโรค ตัวบ่งชี้ที่สูงถึง 810 ^ 5 ถือเป็นภาระที่ต่ำและด้วยการรักษาที่เหมาะสมจะรับประกันผลลัพธ์ที่น่าพอใจ ค่าที่สูงกว่านั้นต้องการการตรวจสอบในเชิงลึกและการกำหนดการรักษาระยะยาว เพื่อผลลัพธ์เชิงบวกที่ไม่มีใครรับรองได้
- ผลการสร้างจีโนไทป์ในเชิงบวกบ่งชี้ว่ารู้จักจีโนไทป์ใด ผลลบบ่งชี้ว่าไม่มีไวรัสฟลาวิไวรัส หรือมีจีโนไทป์ที่ไม่ปกติสำหรับภูมิภาคนี้
การทดสอบ PCR เชิงบวกบ่งชี้ว่าอย่างไร
โรคร้ายแรงใด ๆ ต้องได้รับการวินิจฉัยอย่างครอบคลุม PCR ตับอักเสบซีในเชิงบวกยืนยันการวินิจฉัย แต่การคาดการณ์สามารถทำได้หลังจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและเครื่องมือเท่านั้น
การตรวจพบไวรัสไม่ได้ให้ภาพที่สมบูรณ์ของพยาธิวิทยา จำเป็นต้องระบุประเภทและลักษณะของมัน เพื่อดูว่ามันส่งผลต่อตับและอวัยวะอื่นๆ อย่างไร การตรวจหาไวรัสตับอักเสบซีในระยะเริ่มต้นมักมีผลการรักษาที่ดี
PCR เชิงลบที่มี ELISA เป็นบวก
เมื่อสังเกตลักษณะอาการของความเสียหายของตับ มีโอกาสสูงที่การติดเชื้อจะเข้าสู่ร่างกายแล้ว ดังนั้นคุณควรติดต่อแพทย์ตับหรือผู้เชี่ยวชาญด้านโรคติดเชื้อ ในระหว่างการสัมภาษณ์ ผู้เชี่ยวชาญจะรวบรวมประวัติและกำหนดการสอบที่จำเป็น
ถ้าผลการศึกษาเกี่ยวกับ PCR ไวรัสตับอักเสบซีเป็นลบ และเอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์เป็นบวก ซึ่งบ่งชี้ว่ามีแอนติบอดีต่อ flavivirus ในเลือด สิ่งนี้มักเกิดขึ้นเมื่อการติดเชื้อเข้าสู่ร่างกายในปริมาณเล็กน้อย ดังนั้นระบบภูมิคุ้มกันจึงรับมือได้ด้วยตัวเอง แต่คนดังกล่าวยังถือว่าติดเชื้อและต้องตรวจทุก 6 เดือน หากผลการทดสอบดังกล่าว บุคคลใดถูกปฏิเสธการตรวจสุขภาพฟรี ควรใช้ PCR โดยเสียค่าธรรมเนียมเพื่อรักษาสุขภาพ และหากผลการทดสอบเป็นบวก ให้ติดต่อผู้เชี่ยวชาญเพื่อวินิจฉัยและรักษา
ข้อดีและข้อเสียของวิธีการ
เมื่อเริ่มวินิจฉัยโรคตับอักเสบซี PCR มีข้อดีหลายประการ:
- ตรวจหาเชื้อโรคในระยะแรก
- คำจำกัดความของไวรัสที่ถูกต้อง
- ประสิทธิภาพของการวินิจฉัย
- อัตราความผิดพลาดขั้นต่ำ
- ความไวสูง
ข้อเสียของวิธีการ:
- การวิเคราะห์ต้นทุนสูง การทดสอบต้องใช้อุปกรณ์ราคาแพง รีเอเจนต์ และบุคลากรทางการแพทย์ที่มีคุณวุฒิสูง รวมกันได้เป็นจำนวนมาก
- ข้อกำหนดที่เข้มงวดสำหรับการขนส่งวัสดุชีวภาพ
รักษาตับอักเสบ
การวิเคราะห์ PCR สำหรับไวรัสตับอักเสบซีถือเป็นพื้นฐานในการวินิจฉัยโรค แต่ยังไม่ชัดเจน เพื่อให้การรักษามีประสิทธิผล จำเป็นต้องมีการศึกษาในห้องปฏิบัติการและเครื่องมือเพิ่มเติมจำนวนหนึ่ง หลังจากผ่านทั้งหมดมาตรการวินิจฉัยที่แพทย์กำหนดให้การรักษา:
- ไดเอท 5 ถูกกำหนด
- ไม่รวมแอลกอฮอล์
- รับ Interferon และ Ribavirin เป็นเวลา 25 วัน
- หลักสูตร hepaprotectors "Essential", "Karsil", "Phosphogliv"
- ในกรณีพิเศษ พลาสมาเฟเรซิสแบบไม่ต่อเนื่องจะถูกใช้
ยาที่แพทย์สั่งจ่ายใช้เป็นประจำโดยไม่เปลี่ยนขนาดยา ระยะเวลาในการใช้ยาจะถูกกำหนดโดยแพทย์หลังจากผ่านการทดสอบการควบคุม หลังจบหลักสูตรบำบัดต้องไปพบแพทย์ทุก 6 เดือน
PCR-diagnostics ช่วยในการระบุสาเหตุของโรคตับอักเสบซีในระยะเริ่มต้น สิ่งนี้มีส่วนช่วยให้เกิดประสิทธิผลของการรักษาและป้องกันการเปลี่ยนผ่านของโรคไปสู่รูปแบบที่เป็นอันตราย เช่น ตับแข็งและมะเร็งตับ
